產(chǎn)品名稱：【CAS:9015-85-4,T4 DNA連接酶,T4 DNA Ligase】
英文名稱：T4 DNA Ligase
CAS號(hào)：9015-85-4
級(jí)別：BR
分子量：55.3kDa，單體
來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度：1u/ul(200CEU/ul）
活性定義：是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中，37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位：20ul反應(yīng)體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量）
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制劑：當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時(shí)，可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意：聚乙二醇（PEG）可*地增加平末端DNA的連接效率，PEG4000在反應(yīng)體系中的*濃度為5%（w/v）；T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉(zhuǎn)化時(shí)，連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%；電轉(zhuǎn)化之前，先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制：測(cè)試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測(cè)：粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對(duì)單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途：生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù)；連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè)；位點(diǎn)特異性突變；擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性
保存： -20°C
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CAS:97-56-3,鄰氨基偶氮甲苯 153260250
CAS:62-56-6，硫脲 1mL 5.0 mg/mL in MeOH Room temperature AS-E0294
6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚-5-酮，826-73-3，>97.0%(GC)，5G| T1347-5G
CAS:540-84-1,異辛烷/2,2,4-*基戊烷 364671000
CAS:64-10-8,苯基脲 131020050
2-乙基蒽醌，84-51-5，>98.0%(GC)，25G| E0063-25G
CAS:1195-45-5,4-氟苯基 119600050
CAS:,Forskohlii (Plectranthus barbatus) Root Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE) ASB-00060521-001
CAS:4360-63-8,2-溴甲基-1,3-二氧雜烷 209841000
3-硝基苯肼鹽酸鹽，636-95-3，25G| N0232-25G
CAS:879-39-0，2,3,4,5-四硝基苯 10mg Room temperature P-1000N
四乙二醇單十二烷基醚，5274-68-0，>98.0%(GC)，5ML| T0769-5ML
3-羥基-4-甲基苯甲酸，586-30-1，5G| H0929-5G
2-氨基-4-甲基苯并噻唑，1477-42-5，>98.0%(T)，25G| A1344-25G
CAS:6080-33-7 ,SINOMENINE HYDROCHLORIDE(P) ASB-00019280-010
2-(對(duì)甲苯基)吡啶，4467-06-5，>95.0%(GC)，25G| T1228-25G
4-硝基*，1504-63-8，>98.0%(GC)，1G| N0690-1G
CAS:122-99-6,2-苯氧基乙醇 130240051
CAS:13139-17-8,N-(芐氧基羰酰氧基)琥珀酰亞胺 211171000
4-己基苯胺，33228-45-4，>98.0%(GC)(T)，5G| H0890-5G
CAS:131-17-9,鄰苯二甲酸二丙酯 276620025
CAS:,Boneset (Eupatorium perfoliatum) Stem VBRM ASB-00030782-005
內(nèi)-四氫二環(huán)戊二，2825-83-4，>97.0%(GC)，25G| T0409-25G
CAS:24686-78-0,1-苯?；?4-酮 148150010
CAS:54848-30-5 ,PROTOGRACILLIN(P) ASB-00016312-005
CAS:546-80-5 ,THUJONE, alpha-(-)-(SG) ASB-00020287-100
CAS:402-44-8,4-氟三氟甲苯 187390050
3-乙基苯并噻唑溴化物，32446-47-2，>98.0%(LC)(T)，10G| E0395-10G
咪唑-4(5)-乙酸鹽酸鹽，3251-69-2，>98.0%(T)，5G| I0229-5G
2,2,4,4-四氟-1,3-二硫雜環(huán)丁烷，1717-50-6，>98.0%(GC)，5G| T1776-5G
農(nóng)殘檢測(cè)混標(biāo)(9種組分) 1mL 純度：Varied conc. in Toluene Store at 2-8℃ AE-00021
CAS:15231-91-1,6-溴-2-萘酚 107171000
CAS:7440-22-4，銀 500mL 1000 μg/mL in 2-5% Nitric acid Room temperature AA53N-5
4-乙基苯磺酰，16712-69-9，>95.0%(GC)，25G| E0065-25G
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