中文名稱：Stbl2 化學(xué)感受態(tài)細胞
英文名稱：Stbl2 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格：100μl×10管
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164555
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：
Stbl2是采用大腸桿菌JM109菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，適合于多種插入片段的化學(xué)轉(zhuǎn)化。本品使用pUC19質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率可達109cfu/μg。 具有以下特點： ① 更適于不穩(wěn)定插入片段（正向重復(fù)序列，逆轉(zhuǎn)錄病毒序列等）的克隆； ② 更適于克隆慢病毒載體、甲基化的基因組序列； ③ 于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提??； ④ 不存在lacIqZΔM15，不可用于藍、白斑篩選。 本品基因型：F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB) 。 注意事項 1）感受態(tài)細胞應(yīng)保存在-80℃，不可反復(fù)凍融和放置時間過長，以免降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。 2）整個轉(zhuǎn)化操作，嚴(yán)格根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件要求進行。 3）為確保高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程應(yīng)盡量輕柔，并保持低溫。 4）為防止轉(zhuǎn)化不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，低化實驗可能遇到的風(fēng)險。 儲存條件：-80℃ |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
PH9-10顯色（THYMOLPHTHALEIN）指示溶液
P11-12顯色（SULFO ORANGE）指示溶液
動物細胞醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法
動物組織醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法
細菌醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法定量檢測試劑
小鼠內(nèi)毒素(ET)elisa ，英文名： ET ELISA Kit
大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA檢測試劑盒Ratiduronatesulfatase,IDSELISAKit 96T/48T
人兒茶酚抑素免疫試劑盒 Human catestatin ELISA Kit
RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物-CA153elisa規(guī)格：96T/48T
DHPR受體蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
MouseParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPelisa小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)elisa規(guī)格：96T/48T
Stbl2 化學(xué)感受態(tài)細胞豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)elisa檢測試劑盒
豚鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)elisa檢測試劑盒
豚鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)elisa分析檢測試劑盒
豚鼠干擾素γ(IFNγ)elisa檢測試劑盒
豚鼠干擾素α(IFNα)elisa檢測試劑盒
