注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng)：植物硝態(tài)氮測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測(cè)方法：微量法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6496
產(chǎn)品分類(lèi)：氮代謝系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況，可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測(cè)定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量，不僅能夠反映出植物的氮素營(yíng)養(yǎng)情況，而且對(duì)鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。 測(cè)定原理 在濃酸條件下，NO3-與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸，硝基水楊酸在堿性條件下（PH>12）呈黃色，在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測(cè)定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
大腸桿菌成套生化鑒定管 4種*4套
2 ug pcDNA3.1（+）/His pcDNA3.1（+）/His 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
1%吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 1%Tween80-Corn Meat Agar Mediun 250g
1瓶 TT細(xì)胞株 TT 低溫運(yùn)輸和保存
50T 耐金黃菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5mL 周細(xì)胞生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0 Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
20次 Southern專(zhuān)用DNA Marker（DIG）
2 ug pGEX-5X-1 pGEX-5X-1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
支原體培養(yǎng)基 Mycoplasma Medium 250g
1瓶 H1975/細(xì)胞株 H1975/ 低溫運(yùn)輸和保存
植物硝態(tài)氮測(cè)試盒微量法RASSF6 RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
IRAK1 白介素-1受體相關(guān)激1抗體 規(guī)格: 0.1mlRAB38 G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB38抗體 規(guī)格: 0.2ml
ASBT/SLC10A2 頂膜鈉依賴(lài)性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSSB/La 干燥癥SSB/La抗體 規(guī)格: 0.2ml
CLASP2 細(xì)胞連接相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlMSH Alpha 促黑細(xì)胞激素α抗體 規(guī)格: 0.1ml
TrK A/NTRK1 酪激A抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 0.1ml
C10orf63/Enkurin 10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體 規(guī)格: 0.2mlPXR 孤兒核受體PAR1抗體 規(guī)格: 0.2ml
ROC1/RNF75 環(huán)指蛋白75抗體 規(guī)格: 0.2mlSTIM1 基質(zhì)交分子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
DEDD2 死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlMidkine 中期因子/肝素結(jié)合生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml
BAG3 Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
Rab17 RAS基因相關(guān)蛋白R(shí)AB17抗體 規(guī)格: 0.2ml
