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ELISA試劑盒的問題及解決方法

閱讀:570發(fā)布時間:2018-6-4

    zui近在做血清ELISA,重復了很多次,結(jié)果每次結(jié)果的背景值都很高,OD值達到0.6,很頭疼,嘗試過用封閉液稀釋抗體和血清,也嘗試過重重拍板拍干,結(jié)果均無濟于事!希望我司技術(shù)幫忙解決。根據(jù)我們的技術(shù)探討得出以下幾點:

    ELISA試劑盒不正確的洗滌:洗滌不充分或漏洗都有會導致背景高。核對ELISA洗液的量并確保所有洗滌步驟都完成;確保eBioscience ELISA洗液被用并稀釋正確。讓洗液在孔里至少停留15-30s。

    ELISA試劑盒底物被污染: 底物溶液自身是沒有顏色的,確保底物在用之前沒有被金屬離子或氧化試劑污染。

    ELISA試劑盒稀釋液被污染:大部分ELISA稀釋液是蛋白基質(zhì),*次打開后就有可能已經(jīng)被污染了,必須用無菌的移液管從瓶底移取使用。

    ELISA試劑盒底物曝光:底物曝光可能會變藍,解決辦法就是使用前保存在棕色瓶里。

    ELISA試劑盒偶聯(lián)物稀釋有誤:確保偶聯(lián)物稀釋按照說明書的要求,偶聯(lián)物濃度太高有可能導致高背景。

    ELISA試劑盒孵育時間和溫度不對:孵育時間和溫度嚴格按照ELISA操作流程規(guī)定。


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