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優(yōu)勢供應(yīng) 北京大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒 價格

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更新時間:2016-10-15 15:52:55瀏覽次數(shù):551次

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優(yōu)勢供應(yīng) 北京大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒 價格
本公司*代理各種種屬的elisa試劑盒(酶聯(lián)免疫法)同時還經(jīng)營各種*產(chǎn)品:sigma,amresco(大量現(xiàn)貨),QIAGEN 、Abcam、OXOID試劑盒,Corning、Axygen耗材等,貨期穩(wěn)定!

產(chǎn)品名稱:大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒
產(chǎn)品英文名稱:Rat apoptosis inducing factor,AIF ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
檢測方法:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)
標(biāo)本:血清,血漿,細胞上清液,組織等
試劑盒說明書:請來電或者郵件索取
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒
實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘,微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到10^4-10^6/ml左右,通過反復(fù)凍融,
使細胞破壞,并放出細胞內(nèi)成份?;蛘呒毎暦鬯?,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10 -20分鐘后,
以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集 ,以1000×g離心、15 分鐘 ,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取 組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,超聲破碎儀,將標(biāo)本勻漿,以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ,收集上清進行檢測 。
7. 樣品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。
8. 保存 :如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-80 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度加熱解或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒
操作步驟 :
1. 取出 試劑盒,室溫( 20 -25 ℃)放置 30 分鐘。
2. 分組: 取出 96 孔板 根據(jù)待測樣品數(shù) 量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需板條,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度)、空白 孔、待測樣品組。
注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入100ul的蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul 的酶標(biāo)溶液 (空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15 -30s 30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑A液 50ul 后,再加入顯色劑 B液 50ul 。
8. 終止: 25 -37 ℃下避光反應(yīng)10 -15分鐘, 加入 50 ul 終止液。
9. 讀板:在 450nm波長讀取各孔的O 值。注: 讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,
讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30 分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒
數(shù)據(jù)計算
1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:各標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值減去底色即堅強空白孔OD 值(數(shù)據(jù)處理如下),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
1.1軟件處理:建議用戶使logit-log模式或四參數(shù)據(jù)處理模式( y=(a-d)/(1+(x/c)^b)+d )1.2計算器或手工作圖處理:Logit-log 計算:以6個標(biāo)準(zhǔn)品OD 值的 Logit為縱坐標(biāo) y,以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度的 log值為橫坐標(biāo)X,繪制曲線圖。logit值計算公式如下:logit=ln(B/ B0)(1-B/ B0)手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo),在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對應(yīng)的 B/B0B為縱坐標(biāo)在 logit-log坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時是一條直)。
2. 根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后濃度值。
3.敏感度:1.0µmol/L
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒
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