RH-35肝癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）RH-35肝癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
（R）-3-（Boc-aMino）pyrrolidine （R）-3-叔丁氧羰基氨基吡咯烷 122536-77-0
（R）-（+）-3-METHYLSUCCINIC ACID 1-MONOMETHYL ESTER （R）-（+）-3-甲基琥珀酸單甲酯 81025-83-4
（3alpha,5beta,7alpha,12alpha）-7,12-Bis（forMyloxy）-3-hydroxycholan-24-oic acid （3ALPHA,5BETA,7ALPHA,12ALPHA）-7,12-雙（甲酰氧基）-3-羥基膽烷-24-酸 64986-86-3
（3aR,4S,5R,6aS）-（-）-5-（Benzoyloxy）-hexahydro-4（-hydroxyMethyl）-2H-cyclopenta[b]furan-2-one （3aR,4S,5R,6aS）-（-）-5-（苯甲酰氧基）-六氫-4-（羥甲基）-2H-環(huán)戊并[b]呋喃-2-酮 39746-00-4
（3aR,4S,7aR）-Octahydro-4-hydroxy-4-[2-（3-Methylphenyl）ethynyl]-1H-indole-1-carboxylic acid Methyl ester （3AR,4S,7AR）-八氫-4-羥基-4-[2-（3-甲基苯基）乙炔基]-1H-吲哚-1-羧酸甲酯 543906-09-8
（3aR,7aR）-hexahydro-2-benzofuran-1,3-dione 反式-1,2-環(huán)己二羧酸酐 71749-03-6
（3aS,7aS）-hexahydro-2-benzofuran-1,3-dione 反式-1,2-環(huán)己二羧酸酐 31982-85-1
3-BROMO-PROPYL）-DIMETHYL-AMINE （3-溴丙基）二甲基胺 53929-74-1
（3-brpMopropyl）triethylaMMoniuM broMide （3-溴丙基）*基* 3779-42-8
（3-BroMo-pyridin-2-yl）-Methyl-aMine  214977-38-5
（3-CARBOXYPROPYL）TRIMETHYLAZANIUM CHLORIDE （3-羧丙基）*基氯化銨 6249-56-5
（3-Chloro-4-Methylphenyl） MethylcyanocarboniMidodithioate  152382-24-6
（3-Methoxy-phenyl）-hydrazine 3-甲氧基苯肼 15384-39-1
（3-Nitrobenzyl）MethylaMine N-甲基-3-硝基芐胺 19499-61-7
（3R）-（-）-3-AMinopyrrolidine dihydrochloride （R）-3-氨基吡咯烷二鹽酸鹽 116183-81-4
（R）-（+）-3-（MethylaMino）pyrrolidine （3R）-（+）-3-（甲氨基）吡咯烷 139015-33-1
（R）-tert-butyl 3-forMylpyrrolidine-1-carboxylate （3R）-3-甲?；?1-吡咯烷甲酸叔丁酯 191347-94-1
（3R）-6,8a-diMethyl-3-propan-2-yl-1,2,3,4,5,8-hexahydroazulen-3a-ol  465-28-1
（3R,3aS,6aR）-hexahydrofuro[2,3-b]furan-3-ol （3R,3AS,6AR）-六氫呋喃并[2,3-B]呋喃-3-醇 156928-09-5
（3R,4R）-3-（5,6-Dihydro-4H-pyrrolo[3,2,1-ij]quinolin-1-yl）-4-（1H-indol-3-yl）-2,5-pyrrolidinedione （3R,4R）-3-（5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉-1-基）-4-（1H-吲哚-3-基）吡咯烷-2,5-二酮 905854-02-6
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。