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U-937組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-07-29 01:13:46瀏覽次數(shù):429次

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細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)U-937組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
(7)流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
Hexanoic acid,2,6-diisocyanato-, ethyl ester, (2S)- L-賴氨酸二異氰酸酯 45172-15-4
Hexanoylglycine 己酰* 24003-67-6
HEXOPRENALINE SULPHATE 海索那林 3215-70-1
Furalazine 呋喃拉嗪 556-12-7
furanoMycin  18455-25-9
furilazole  121776-33-8
FuroMollugin 5-羥基萘并[1,2-B]呋喃-4-甲酸甲酯 61658-41-1
Furterene 呋氨蝶啶 7761-75-3
FUSEL OIL 雜醇油 8013-75-0
FW 358.2 MESO-1,4-雙(3,4-二甲氧基苯基)二甲基丁烷 5701-82-6
GADOBENATE DIMEGLUMINE  12700-20-8
Gadopentetate DiMegluMine * 86050-77-3
Gadoteric acid 釓特酸 72573-82-1
Gadoteridol 釓特醇 120066-54-8
GALACTOCEREBROSIDES 半乳糖苷神經(jīng)酰胺 85305-88-0
galantaMine 加蘭他敏 357-70-0
GalantaMine HydrobroMide * 69353-21-5
Gallic acid 沒食子酸 149-91-7
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

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NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

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