RKO結(jié)腸腺癌細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清，ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級胎牛血清血清，新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）RKO結(jié)腸腺癌細胞：
（1） 收集1×106個細胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個細胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個細胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞；固定待測。
（7）流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時。
（3）調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升，取1毫升細胞懸液，用PBS洗三次，細胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
ETHYL 5-HYDROXYINDOLE-2-CARBOXYLATE 5-羥基吲哚-2-甲酸乙酯 24985-85-1
ETHYL 5-METHYL-1,2,4-OXADIAZOLE-3-CARBOXYLATE 5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-羧酸乙酯 40699-38-5
ETHYL 8-METHOXY-2-OXO-2,3,4,5-TETRAHYDRO-1H-BENZO[B]AZEPINE-4-CARBOXYLATE 4-[[9-氯-7-（2,6-二氟苯基）-5H-嘧啶并[5,4-D][2]苯并氮雜卓-2-基]氨基]苯甲酸 869363-13-3
ETHYL B-D-GLUCURONIDE  17685-04-0
Ethyl cyanoacrylate 氰基丙烯酸乙酯 7085-85-0
Ethyl D-glucopyranoside 乙基 BETA-D-吡喃葡萄糖苷 3198-49-0
Ethyl diazophenylacetate 2-重氮基-2-苯基乙酸乙酯 22065-57-2
Ethyl difluoroacetate  454-31-9
Ethylene glycol diethyl ether 乙二醇二ym 629-14-1
Mono-ethyl sulfate 硫酸單乙酯 540-82-9
ETHYL ISOCYANATOACETATE 異氰酰乙酸乙酯 2949-22-6
Ethyl Malonyl chloride 氯甲酰乙酸乙酯 36239-09-5
Ethyl Methyl carbonate 碳酸甲乙酯 623-53-0
ETHYL METHYLPHOSPHINATE 甲基次磷酸乙酯 16391-07-4
Ethyl nitrate 硝酸乙酯 625-58-1
ETHYL PIPERAZINE-1-CARBOXYLATE N-哌嗪甲酸乙酯 120-43-4
Ethyl oleate 油酸乙酯 111-62-6
Ethyl pyrazole-4-carboxylate 4-吡唑甲酸乙酯 37622-90-5
Ethyl thioglycolate 巰基乙酸乙酯 623-51-8
Ethyl trans-2- hydroxycinnaMate 反式-2-羥基肉桂酸乙酯 6236-62-0
Ethyl trans-4-oxo-2-butenoate 反式-4-氧基-2-丁烯酸乙酯 2960-66-9
Ethyl trifluoropyruvate 3,3,3-三氟丙酮酸乙酯 13081-18-0
Ethyl vinyl ketone 1-戊烯-3-酮 1629-58-9
ethyl（E,4S）-4-[[（2R,5S）-2-[（4-fluorophenyl）Methyl]-6-Methyl-5-[（5-Met hyloxazole-3-carbonyl）aMino]-4-oxo-heptanoyl]aMino]-5-[（3S）-2-oxopyrro lidin-3-yl]pent-2-enoate （2E,4S）-4-[（2R,5S）-2-（4-氟芐基）-6-甲基-5-（5-甲基異惡唑-3-基甲酰氨基）-4-氧代庚酰氨基]-5-[[（3S）-2-氧代-3-吡咯烷基]-2-戊烯酸乙酯 223537-30-2
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。