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分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-06-28 14:44:07瀏覽次數(shù):702次

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分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體) 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞 ,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
ETHYL 4-CHLOROPHENYLACETATE 4-乙酸乙酯 14062-24-9
ethylsulfanylMethanethioaMide  625-61-6
ETHYLTRIBUTYLTIN  19411-60-0
EthyltriMethyllead 乙基*基鉛 1762-26-1
ELASTATINAL (2S)-2-[(4S)-2-氨基-1,4,5,6-四羥基4-嘧啶基]-N-[[[(1S)-1-羰基-3-甲基丁基]氨基]羰基]甘氨酰-N1-[(1S)-1-甲基-2-氧乙基-L-*甲酰胺 51798-45-9
ELEDOISIN 依來(lái)多辛 69-25-0
ELEMENE 欖[香]烯 30824-67-0
Eletriptan 依來(lái)曲普坦 143322-58-1
ELLIPTICINE 橢圓玫瑰樹(shù)堿 519-23-3
SodiuM xylan polysulfate 硫酸戊聚糖鈉 37319-17-8
Eltoprazine hydrochloride 1-(2,3-二氫-1,4-苯并二烷-5-基)哌嗪鹽酸鹽 98224-03-4
EMbelin 恩貝酸/恩貝靈 550-24-3
eMbutraMide  15687-14-6
EMoxipin  77702-17-1
Enalkiren 依那吉侖 113082-98-7
ENDURACIDIN HYDROCHLORIDE 恩拉霉素 11115-82-5
Eniluracil; ADH-300004; GW-776  59989-18-3
ent-16beta,17-Dihydroxy-19-kauraic acid ENT-16BETA,17-DIHYDROXY-19-KAURANOIC ACID 3301-61-9
Entecavir hydrate *一水合物 209216-23-9
Enviradene 恩韋*** 80883-55-2
ETHYL ALL CIS-5,8,11,14,17- EICOSAPENTAENOATE 順-二十碳五烯酸乙酯 86227-47-6
Epichlorohydrin-1,1-d2  83385-55-1
EPICHLOROHYDRIN-2-D1 表氯醇-2-D 70735-27-2
EPICHLOROHYDRIN-D5 氘代環(huán)氧氯丙烷 69533-54-6
Epicriptine 表隱亭 88660-47-3
EPINEPHRINE BITARTRATE 酒石酸腎上腺素 51-42-3
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來(lái),移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

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NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

QGY-7701肝癌細(xì)胞ATCC株?詢價(jià)

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