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中級(jí)會(huì)員 | 第9年

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4.3%三氯醋酸甲苯溶液特點(diǎn)

時(shí)間:2021/2/21閱讀:3347
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生化性質(zhì)

TCA與蛋白質(zhì)之間主要有以下幾個(gè)方面的作用:①在酸性條件下與蛋白質(zhì)形成不溶性鹽.②作為蛋白質(zhì)變性劑使蛋白質(zhì)構(gòu)象發(fā)生改變,暴露出較多的疏水性基團(tuán),使之聚集沉淀.③隨著蛋白質(zhì)分子量的增大,其結(jié)構(gòu)復(fù)雜性與致密性越大,TCA可能滲入分子內(nèi)部而使之較難被*除去,在電泳前樣品加熱處理時(shí)可能使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生酸水解而形成碎片,而且隨時(shí)間的延長(zhǎng)這一作用愈加明顯;
在電泳時(shí)使用TCA對(duì)蛋白質(zhì)樣品的濃縮或除鹽時(shí),對(duì)于分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì),要慎重選擇TCA.對(duì)小分子量蛋白質(zhì)的濃縮,采用TCA時(shí)也有兩點(diǎn)需要注意:一是用TCA沉淀后,盡量用丙酮*抽提TCA;二是樣品處理后要盡快進(jìn)行電泳分析,以免發(fā)生聚集及斷裂,造成結(jié)果分析的不準(zhǔn)確。

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