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技術(shù)文章

酶標(biāo)儀在Elisa檢測中賦予重要作用

閱讀:646發(fā)布時(shí)間:2015-9-17

酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀,通常指于測讀 ELISA 結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多Elisa試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可到0.0 01,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。酶標(biāo)儀的可測范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000,新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900,甚至更高超出可測上限的 A 值常以"*""over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標(biāo)儀的可測范圍0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA 中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。
酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在 15~30,使用前先預(yù)熱儀器15-30 分鐘,測讀結(jié)果更穩(wěn)定。
測讀 A 值時(shí),要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD 492nm 波長。有的酶標(biāo)儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD 492nm W1,630nm W 2,zui終測得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。



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