在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。新鮮標(biāo)本應(yīng)盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，應(yīng)及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩Ｈ缫蛱厥庠蛐枰ㄆ?、多次收集?biāo)本，請(qǐng)取材后，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或以下條件下保存。由于蛋白樣品多不穩(wěn)定，極易降解，應(yīng)避免反復(fù)凍融，以減少對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。今天我們和大家分享ELISA實(shí)驗(yàn)中樣本的收集方法：
一、液體類標(biāo)本，液體類標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3.尿液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（pH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
二、組織標(biāo)本：采集標(biāo)本后，稱取組織凈重，用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后要保存在2-8℃的溫度，加入一定量的PBS（pH7.2-7.4），用手工或電動(dòng)勻漿器將標(biāo)本充分勻漿。4℃離心（10000-15000轉(zhuǎn)/分）10-20分鐘。收集上清,留取適量檢測(cè)，其余冷凍保存?zhèn)溆谩?
備注：如果樣本中的待檢物需要提純，請(qǐng)客戶自行處理。
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