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技術(shù)文章

ELISA實(shí)驗(yàn)的應(yīng)對(duì)策略

閱讀：281發(fā)布時(shí)間：2018-11-19

ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，ELISA試劑盒如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。今天我們將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題解決辦法總結(jié)于下，整理出應(yīng)對(duì)策略：
選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

標(biāo)本收集與保存：避免使用肉眼可見(jiàn)的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本；2-8℃下，標(biāo)本可放置24-48小時(shí)，長(zhǎng)期保存需放置-20℃下。請(qǐng)避免反復(fù)凍融。

試劑盒中會(huì)有提示，一般需要準(zhǔn)備的有：

1、洗滌液；用前配制；有的試劑盒會(huì)標(biāo)明，配好的4度下一般可以放一個(gè)月；如果沒(méi)有標(biāo)明，盡量用新鮮的，不要多配制。

2、顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘配制；

3、標(biāo)準(zhǔn)品：有的試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)配制好的，4度保存，有的是要現(xiàn)配制的，按照說(shuō)明書(shū)操作；

4、濃縮*結(jié)合的二抗和HRP：如果需要配制，試劑盒沒(méi)注明配好可以保存多久的話，盡量現(xiàn)配現(xiàn)用（用前15分鐘配制）；

原則是：試劑盒上沒(méi)有指出配制物的儲(chǔ)藏方式的話，應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開(kāi)蓋前要離心，以免蓋子上粘連以后總量不夠。室溫溫育的試劑，特別是溫育時(shí)間比較短的實(shí)驗(yàn)操作的試劑，加樣對(duì)數(shù)據(jù)的影響比較大，特別要注意加樣問(wèn)題。

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