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影響ELISA試劑盒的特異性因素有哪些

閱讀：876發(fā)布時(shí)間：2019-4-22

ELISA實(shí)驗(yàn)自問世以來，以其敏感性高，特異性強(qiáng)，操作簡便、安全，而廣泛應(yīng)用于臨床診斷。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會(huì)碰到非特異性問題。

試劑盒特異性因素：

1、固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板為常見[1]。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別，各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此，在選擇試劑盒同時(shí)要對(duì)其使用的微孔板型號(hào)進(jìn)行認(rèn)證，評(píng)估。

2、包被物的純度。在酶聯(lián)免疫測(cè)定尤其是間接ELISA中，試劑的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術(shù)條件的限制，包被用抗原或抗體的純度不可能達(dá)到100%，所以有些非特異性顯色不可避免，只能盡可能提高純度，提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。

3、包被抗體的效價(jià)。具有高親和力和高特異性的包被抗體，是決定試劑特異性的重要方面。

4、封閉。是ELISA中重要的一步，目的是封閉固相載體表面尚未被所占據(jù)的空隙[2]，減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。

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