甲胎蛋白（AFP）在臨床上作為肝細(xì)胞癌的診斷以及療效觀察指標(biāo)已經(jīng)被廣泛認(rèn)可， 但是 AFP 只具有相對(duì)特異性，即肝癌患者中 AFP 升高，部分良性肝病患者中也升高，因此，尋求肝癌早期診斷特異性指標(biāo)具有重要臨床意義。研究發(fā)現(xiàn)， AFP 在不同病理情況下產(chǎn)生的分子糖鏈結(jié)構(gòu)不同，肝癌病理情況下主要產(chǎn)生與小扁豆凝集素具有強(qiáng)結(jié)合力的甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3），本研究采用親和微量離心柱法分離 AFP-L3，應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法對(duì)不同肝病患者總AFP 和 AFP-L3 進(jìn)行檢測(cè)，探討 AFP-L3 在鑒別良惡性肝病中的應(yīng)用價(jià)值。
測(cè)定方法：AFP-L3 的分離采用親和微量離心柱法， 柱內(nèi)預(yù)先裝有耦聯(lián)了小扁豆凝集素的瓊脂糖，可特異性地結(jié)合AFP-L3，當(dāng)血清流過(guò)離心管時(shí)，樣本中的 AFP-L3 與管內(nèi)親和介質(zhì)結(jié)合，經(jīng)過(guò)清洗和離心洗脫過(guò)程，獲得含有 AFP-L3的樣本，然后用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)總 AFP 和 AFP-L3 的含量，計(jì)算AFP-L3 占 AFP 總量的百分比，AFP-L3/AFP躍10%為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。
目前肝癌的診斷主要依靠 AFP，但AFP在一些良性肝病患者中也會(huì)有不同程度的升高。因?yàn)樵?strong>肝細(xì)胞再生過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一定量的AFP。
本研究結(jié)果顯示，AFP逸400滋g/L和AFP約400滋g/L 的肝癌組其總AFP-L3/AFP 陽(yáng)性率明顯高于非肝癌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明用本方法檢測(cè)的 AFP-L3/AFP > 10%為診斷指標(biāo)時(shí)，可以有效的區(qū)分良、惡性肝病患者；而低濃度AFP陽(yáng)性肝癌組與高濃度AFP 陽(yáng)性肝癌組相比，其 AFP-L3 陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明AFP-L3 用于肝癌診斷不受AFP逸400 滋g /L作為肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)的限制，如果患者血清中總AFP 只有輕微升高，而AFP-L3 所占比例超過(guò)10%，就提示肝癌發(fā)生的可能性較大。對(duì)這樣的患者進(jìn)行隨訪和嚴(yán)密監(jiān)控是很有必要的。筆者同時(shí)對(duì)非肝癌患者之間 AFP-L3/AFP 陽(yáng)性率進(jìn)行比較，結(jié)果顯示差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
目前AFP-L3 檢測(cè)方法主要有植物凝集素親和層析法、聚丙烯酰胺凝膠電泳法、親和印跡法及親和免疫交叉電泳技術(shù)等。這些方法技術(shù)要求較高，操作繁瑣，限制了AFP-L3 在臨床的應(yīng)用。本研究采用親和微量離心柱法，柱內(nèi)預(yù)先裝有耦聯(lián)了小扁豆凝集素的瓊脂糖作為親和介質(zhì),然后利用半抗原糖基進(jìn)行特異性洗脫，并結(jié)合離心技術(shù)，可快速簡(jiǎn)便獲得樣本中的 AFP-L3, 然后用電化學(xué)發(fā)光法 檢測(cè)總 AFP 和AFP-L3 的含量, 方法簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、成本較低，適合臨床推廣應(yīng)用。對(duì)于低濃度AFP陽(yáng)性而AFP-L3 所占比例超過(guò)10%的肝病患者，定期復(fù)查 AFP-L3，動(dòng)態(tài)觀察其變化，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)某些肝病的惡變傾向，對(duì)肝癌的早期診斷意義較大。
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