法氏囊抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品咨詢(xún)：
臨床意義
雞傳染性法氏囊病是由傳染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起雞的一種急性、高度接觸性傳染病。本病主要特征是突然發(fā)病、病程短、發(fā)病率高、病雞嚴(yán)重萎頓、白色下痢、法氏囊B淋巴細(xì)胞損傷、雞體免疫能力受到抑制，雞感染后體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生特異性抗體。檢測(cè)特異性法氏囊抗體可作為該病疫苗免疫狀況及輔助診斷指標(biāo)。
本試劑盒采用法氏囊抗原作固相抗原檢測(cè)雞血清中的特異性法氏囊抗體。本試劑靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。
試劑組成
1.預(yù)包被板48T/96T; 6.*(5號(hào)液)1支;
2.酶結(jié)合物(1號(hào)液)1支; 7. 終止液(6號(hào)液)1支;
3.洗滌液(2號(hào)液)1支; 8. 陽(yáng)性對(duì)照品1支;
4.底物(3號(hào)液)1支; 9. 陰性對(duì)照品1支;
5.顯色劑(4號(hào)液)1支; 10.使用說(shuō)明書(shū)1份;
操作程序
1. 樣本稀釋?zhuān)河?(5號(hào)液)將待檢血清按1:100稀釋,如5ul血清＋500ul*，充分混勻。陰、陽(yáng)對(duì)照不用稀釋。
2. 加樣反應(yīng)：樣本檢測(cè)孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各一孔，取陰性、陽(yáng)性對(duì)照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對(duì)照孔僅加入100ul*(5號(hào)液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液(2號(hào)液)一滴，立即用蒸餾水注滿(mǎn)，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
3. 加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)二滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
4. 顯色反應(yīng)：加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各一滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)一滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）。
結(jié)果判斷
1.肉眼觀察：陰性對(duì)照接近無(wú)色，陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無(wú)色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽(yáng)性。
2.儀器判斷：以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長(zhǎng)）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時(shí)將蒸餾水加滿(mǎn)孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來(lái)水等其它水源。
3.為提高試驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對(duì)陰性對(duì)照測(cè)復(fù)孔以減少誤差。
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