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細胞增殖的酸性磷酸酶檢驗法操作步驟

閱讀:446發(fā)布時間:2014-9-10

細胞增殖的酸性磷酸酶檢驗法操作步驟:

1、96孔細胞培養(yǎng) 板中培養(yǎng)細胞,去培養(yǎng)液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細胞則用離心洗滌)。

2、去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。

3、37℃,孵育1~4h。

4、加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。

5、在多孔酶標儀 上405nm處測光吸收度,將細胞培養(yǎng)板其中不含細胞,同樣處理過的一孔作為空白對照,所測的每孔光吸收度可間接反應每孔中的細胞數。如在同樣條件下作一細胞數的系列標準對照,以細胞數為X軸,光吸收度為Y軸,可作直線回歸,可推算出每孔中的細胞。


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