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人結腸癌細胞*

時間:2014/9/29閱讀:682
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中文名稱:人結腸癌細胞

英文名稱:CACO-2

組織細胞培養(yǎng)技術,人結腸癌細胞深入生物醫(yī)學的每一個角落,其背景知識,實是淵深海闊,涉及的相關領域很多,如:組織學、胚胎學、解剖學、生理學、病理學等等;而作為研究手段和方法,組織細胞培養(yǎng)技術被廣泛地應用于生物醫(yī)學的各個領域,如:細胞生物學、微生物學、免疫學、腫瘤學、發(fā)育學以及臨床醫(yī)學等等。因此,組織細胞培養(yǎng)技術是從事生物醫(yī)學的研究人員應熟悉和掌握的基本技術。

. 人結腸癌細胞細胞計數

實驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數目,即可換算出每毫升細胞懸z液中細胞的細胞數目。

準備工作: 取一瓶傳代的細胞,按照《傳代細胞培養(yǎng)(消化法)》中的傳代方法繁殖細胞,待長成單層后以被使用。

細胞懸液制備: 細胞懸液的制備方法是用0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗滌后,加入培養(yǎng)液(或Hanks液或PBS等平衡鹽溶液),人結腸癌細胞吹打制成待測細胞懸液。

細胞計數:

1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數槽上。

2.制備計數用的細胞懸液:用吸管吸5滴細胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍染液(0.4%)或苯胺黑,活細胞不會被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細胞和死細胞。

3.將細胞懸液滴入計數板:將待測細胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。

4.統(tǒng)計四個大格的細胞數:人結腸癌細胞將血球計數板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動計數板,當看到鏡中出現計數方格后,數出四角的四個大鉻(每個大格含有16個中鉻)中沒有被染液染上色的細胞數目。

人結腸癌細胞

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