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試劑盒靈敏度對試驗作用的影響
ELISA試劑盒靈敏度高是一大利益,而這正本也是和檢查樣本有些有關(guān)的,一般說來,假定待測樣本中方針蛋白的濃度比照高,則對靈敏度央求相對小一些。假定待測樣本中方針蛋白的濃度比照低,則有必要思考靈敏度的疑問。曲線上的zui小濃度是比照準(zhǔn)確的,低于這個值由于與曲線是個“S”型構(gòu)造有關(guān),所以結(jié)果是有過錯的,是一種核算。再加上試驗過錯,所以達(dá)不到志向的作用。主張選擇試劑盒時,應(yīng)當(dāng)看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
那么 ELISA試劑盒檢查哪些計劃呢?一般說來,確診試劑的檢查計劃以ng/ml計。而多見的科研試劑盒中的樣本中的方針蛋白,計劃可隨樣本的類型而改變。所以試驗前應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)試驗的辦法斷定樣本是不是在所購的計劃內(nèi),是很首要的進(jìn)程。ELISA試劑盒假定不在檢查計劃內(nèi),分兩種狀況對待:
A、假定樣本中方針蛋白太低,需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來檢查或濃縮樣本。
B、假定樣本中方針蛋白太高,則需求進(jìn)一步稀釋后進(jìn)行檢查。
在ELISA試劑盒檢測實驗中,包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要,做重組蛋白時,要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA試劑盒后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。
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