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肌酐(Cr)苦味酸比色法試劑盒-齊一生物

時(shí)間:2018/6/21閱讀:1421
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肌酐(Cr)試劑盒說(shuō)明書(shū)

For Research Use only

僅供研究用

貨號(hào):QYS-239313

苦味酸比色法 96T

  • 測(cè)定原理

血漿(血清)除蛋白的上清液中的肌酐與苦味酸產(chǎn)生Jaffe反應(yīng),生成桔紅色的加成物。

  • 試劑組成與配制:

試劑一:50mmol /L 肌酐標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液 20ml*1瓶,4℃保存3個(gè)月。

200mmol /L肌酐標(biāo)準(zhǔn)品貯備液 10ml*1瓶(用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制作),4℃保存3個(gè)月。

試劑二:鎢酸蛋白沉淀劑100ml*2瓶,4℃保存6個(gè)月。

試劑三:苦味酸溶液 60ml*1瓶,4℃保存6個(gè)月。

試劑四:0.75mol/L 氫氧化鈉 60ml*1瓶,4℃保存6個(gè)月。

  • 樣本前處理:

1、取血清(血漿)0.2ml 加入試劑二(鎢酸蛋白沉淀劑)2ml 或者取血清 0.1ml 加試劑二(鎢酸蛋白沉淀劑)1ml,充分混勻,3500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清按下表進(jìn)行測(cè)定。

2、尿液標(biāo)本用雙蒸水作 1︰200 稀釋后,按下表進(jìn)行測(cè)定。

  • 操作步驟

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測(cè)定管

血清(漿)蛋白濾液或稀釋尿液(ml)

 

 

1.6

試劑一(50µmol/L 肌酐標(biāo)準(zhǔn)品)(ml)

 

1.6

 

雙蒸水(ml)

1.6

 

 

試劑三(苦味酸溶液)(ml)

0.5

0.5

0.5

試劑四(0.75mol/L 氫氧化鈉溶液)(ml)

0.5

0.5

0.5

   充分混勻,37℃水浴 10 分鐘,取出后流水冷卻,波長(zhǎng) 510nm,1cm 光徑,雙蒸水調(diào)零, 測(cè)定各管吸光度OD值。

  • 計(jì)算公式
  1. 血清(血漿)樣本:

血清(血漿)肌酐

=

測(cè)定OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

X

11

*

(mmol /L)

標(biāo)準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(50mmol /L)

 

注1:樣品測(cè)試管測(cè)試前的稀釋倍數(shù)(0.2ml樣品加蛋白沉淀液2ml則稀釋11倍)。

 

  1. 尿液樣本:

尿肌酐

=

測(cè)定OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

X

201

**

(mmol /L)

標(biāo)準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(50mmol /L)

 

注2:尿液測(cè)試前用雙蒸水1:200稀釋。

 

  • 計(jì)算舉例:
  • 取血清0.2ml加入鎢酸蛋白沉淀液2ml,充分混勻,3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,取上清液以及50mmol /L 肌酐標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液按上表進(jìn)行測(cè)定,比色時(shí)雙蒸水調(diào)零,測(cè)得結(jié)果為空白管吸光度0.018,標(biāo)準(zhǔn)管吸光度0.288,測(cè)定管吸光度0.081.計(jì)算如下:

血清(血漿)肌酐

=

0.081-0.018

X

50

X

11

=

128.3(mmol /L)

(mmol /L)

0.288-0.018

 

  • 取尿液0.05ml加雙蒸水10ml,充分混勻,取稀釋液以及50mmol /L 肌酐標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液按上表進(jìn)行測(cè)定,比色時(shí)雙蒸水調(diào)零,測(cè)得結(jié)果為空白管吸光度0.018,標(biāo)準(zhǔn)管吸光度0.288,測(cè)定管吸光度0.270.計(jì)算如下

尿肌酐

=

0.270-0.018

X

50

X

201

=

9380.00(mmol /L)

(mmol /L)

0.288-0.018

 

注:1.毫摩爾肌酐與毫克肌酐的換算公式 mg/L=mmol/L*肌酐分子量(113.12)  1mmol/L=1000mmol /L。

2.每個(gè)實(shí)驗(yàn)室盡量建立自己的參考值,實(shí)驗(yàn)用試管必須是實(shí)驗(yàn)試管。

 

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

 

  • 標(biāo)準(zhǔn)品前處理

取200mmol /L肌酐標(biāo)準(zhǔn)品用雙蒸水稀釋成不同濃度:200mmol /L、100mmol /L、50mmol /L、25mmol /L、20mmol /L、12.5mmol /L、10mmol /L、5mmol /L、2.5mmol /L。

 

  • 操作步驟

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

不同濃度肌酐標(biāo)準(zhǔn)品(ml)

 

1.6

雙蒸水(ml)

1.6

 

試劑三(ml)

0.5

0.5

試劑四(ml)

0.5

0.5

 

  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果


  • 繪圖
    見(jiàn)紙質(zhì)版說(shuō)明書(shū) 

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