小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 

我公司的相關(guān)試劑盒的各種指標齊全涉及范圍或分類廣泛，具體如下：

人，小，鼠，大鼠，豚鼠，豬，狗，牛，羊，猴，兔，等動物種屬

小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 樣本齊全：可以為細胞培養(yǎng)上清液，血清， 血漿，尿液，組織液，心房水，體液標本等

細胞因子系列檢測試劑盒     腫瘤標志物系列檢測試劑盒      自身免疫系列檢測試劑盒      

心臟病系列檢測試劑盒        內(nèi)分泌系列檢測試劑盒      心肌梗塞系列檢測試劑盒

肝纖維化系列檢測試劑盒     傳染病系列檢測試劑盒    微生物傳染病系列檢測試劑盒

細胞免疫系列檢測試劑盒      優(yōu)生優(yōu)育系列檢測          特種蛋白系列檢測

小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 操作步驟：
實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。 
為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加*標記抗體工作液 100μl（取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。 
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同*標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。 
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。 
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。 
注： 
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。 
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。 
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。 
4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。 
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 洗板方法 
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次。 
自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 
計算 
以標準物的濃度為橫坐標（對數(shù)坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

（注：本試劑只用于科研，我公司銷售試劑盒均有質(zhì)量保證，有任何質(zhì)量問題免費包退換，敬請垂詢！：/ 高雅   : ）