1.單克隆抗體的大量生產

大量生產單克隆抗體的主要方法：

（1）體外使用旋轉培養(yǎng)管大量培養(yǎng)雜交瘤細胞，從一清液中獲取單克隆抗體。但此方法產量低，一般培養(yǎng)液內抗體含量為10～60μg/ml,如果大量生產，費用較高。

（2）體內接種雜交瘤細胞，制備腹水或血清。

2.單克隆抗體的鑒定

對制備的McAb進行系統(tǒng)的鑒定主要包括以下幾個方面：

（1）抗體特異性的鑒定

除用免疫原（抗原）進行抗體的檢測外，還應該用與其抗原成分相關的其它抗原進行交叉試驗，方法可用ELISA、IFA法。例如：制備抗黑色素瘤細胞的McAb，除用黑色素瘤細胞反應外，還應該用其它臟器的腫瘤細胞和正常細胞進行交叉反應，以便挑選腫瘤特異性或腫瘤相關抗原的單克隆抗體

（2）McAb的Ig類與亞類的鑒定

一般在用酶標或熒光素標記的第二抗體進行篩選時已經基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標或熒光素標記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出來的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標準抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴或夾心ELISA來確定。在作雙擴試驗時，如加入適量的PEG（3%），更有利于沉淀線的形成。

（3）McAb中和活性的鑒定

用動物或細胞的保護實驗來確定McAb的生物學活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感的動物或敏感的細胞，來觀察動物或細胞是否得到抗體的保護。

（4）McAb識別抗原表位的鑒定

用競爭結合試驗，測相加指數(shù)的方法測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別的表位是否相同。

（5）McAb親合力的鑒定

用ELISA或RIA競爭結合試驗來確定McAb與相應抗原結合的親合力。