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江蘇綠葉生物科技有限公司

ELISA試劑盒如何做好優(yōu)化

時(shí)間:2015-8-31閱讀:1161
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ELISA試劑盒質(zhì)量保證是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,許多重要的環(huán)節(jié)都會(huì)影響檢測(cè)質(zhì)量。每一行業(yè)產(chǎn)品都有好有壞,由于生產(chǎn)廠家繁多,讓消費(fèi)者在選擇這一塊有了很大的困擾。以下是有關(guān)ELISA試劑盒包被條件的優(yōu)化:

1.包被液的選擇:一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。

2.包被濃度的選擇:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對(duì)特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。

3.包被溫度的選擇:通常是4-8度條件下放置一個(gè)晚上或者37度保溫2小時(shí),我們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的保持。

4.包被抗原的選擇:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì),比如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。

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