17-Α-羥化酶(17-Α-OH)ELISA試劑盒用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本中人17-Α-羥化酶(17-Α-OH)的含量。

實(shí)驗(yàn)原理：人17-α-羥化酶(17-α-OH)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人17-α-羥化酶(17-α-OH)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的人17-α-羥化酶(17-α-OH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

17-Α-羥化酶(17-Α-OH)ELISA試劑盒的應(yīng)用

用于非經(jīng)典型21-羥化酶缺陷癥與多囊卵巢綜合征的鑒別診斷分析研究

非經(jīng)典型21-羥化酶缺陷癥（NC21-OHD）與具有高雄激素的多囊卵巢綜合征（PCOS）臨床表現(xiàn)相似,實(shí)驗(yàn)室及影像學(xué)檢查重疊且二者均缺乏特異性的診斷標(biāo)準(zhǔn),所以NC21-OHD在臨床上極易被誤診為PCOS,導(dǎo)致長(zhǎng)期進(jìn)行無(wú)效治療。本研究擬通過(guò)對(duì)比臨床已確診的31例NC21-OHD和29例具有高雄激素的PCOS患者的臨床資料,探索二者的鑒別診斷方法,為兩種疾病的早期精準(zhǔn)診斷和治療提供理論依據(jù)。

對(duì)象與方法:

1.對(duì)象選擇31例女性NC21-OHD患者以及同期就診于我科隨機(jī)抽取的29例具有高雄激素的PCOS患者。

2. 方法2.1收集患者血清電解質(zhì)、血脂、卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）、泌乳素（PRL）、性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）、腎素活性（PRA）、醛固酮（ALD）、耐量試驗(yàn)（OGTT）和胰島素釋放試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果,并計(jì)算體重指數(shù)（BMI）、LH/FSH、游離睪酮指數(shù)（FAI）、穩(wěn)態(tài)模型的胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、血糖曲線下面積（GAUC）、胰島素曲線下面積（IAUC）。收集1日法中劑量抑制試驗(yàn)（DAST）前后血清促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）、（COR）、17-羥孕酮（17-OHP）、孕酮（P）、總睪酮（TT）、硫酸脫氫表雄酮（DHEAS）、雄烯二酮（AD）的檢測(cè)結(jié)果,計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)下降的百分比,作為其被抑制率。對(duì)于FSH、LH、P、TT、PRL、DHEAS、AD、17-OHP等指標(biāo)的檢測(cè)均在患者自然月經(jīng)周期的第2-4日或35天以上未來(lái)月經(jīng)任意一天抽取晨8:00空腹外周靜脈血。收集所有研究對(duì)象的子宮附件超聲、肝臟超聲及腎上腺增強(qiáng)CT的檢查結(jié)果以及曾進(jìn)行基因檢測(cè)的25例NC21-OHD女性患者的CYP21A2基因的突變情況。

2.2對(duì)比NC21-OHD組與PCOS組患者的臨床表現(xiàn)、影像學(xué)特征、激素水平及其相關(guān)代謝指標(biāo),并采用ROC曲線分析各指標(biāo)對(duì)于此兩種疾病的鑒別診斷價(jià)值。2.3采用SPSS 22.0和MedCalc v19.0.7統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果:1.PCOS組患者身高和卵巢多囊樣變（PCO）發(fā)生率顯著高于NC21-OHD組（P<0.05）,NC21-OHD組患者腎上腺增生發(fā)生率顯著高于PCOS組（P<0.05）;兩組患者年齡、bmi、收縮壓、舒張壓、血鉀、血鈉以及月經(jīng)紊亂、不孕、多毛的發(fā)生率均無(wú)顯著性差異（p>0.05）。NC21-OHD組患者輕度肥大者12例（38.71%）,PCOS組患者此特征不明顯。

3. NC21-OHD組患者ACTH、17-OHP、AD、P、TT、PRL水平顯著高于PCOS組（P<0.05）;PCOS組患者LH、LH/FSH水平顯著高于NC21-OHD組（P<0.05）;對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行roc曲線分析,曲線下面積（auc）分別為0.673、0.959、0.848、0.917、0.786、0.686、0.843、0.867,通過(guò)對(duì)auc進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)17-ohp與p、lh p="">0.05）,但其顯著大于其余指標(biāo)的AUC（P<0.05）。根據(jù)Youden指數(shù)計(jì)算出17-OHP、P以及LH/FSH的佳切點(diǎn)值分別為3.34ng/ml（敏感度89.7%,特異度93.1%）、0.64ng/ml（敏感度90.0%,特異度75.9%）和1.25（敏感度85.7%,特異度85.7%）。對(duì)NC21-OHD組患者的17-OHP與P進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)二者呈顯著的正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）,而lh p="">0.05）。

3.2 對(duì)比兩組患者1日法中劑量DAST,NC21-OHD組患者17-OHP、AD、TT和P抑制率顯著高于PCOS組（P<0.05）,對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行roc曲線分析,auc分別為0.996、0.972、0.960和0.873。對(duì)17-ohp、ad、tt和p抑制率的auc進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）,根據(jù)Youden指數(shù)計(jì)算出其抑制率佳切點(diǎn)值分別為73.5%（敏感度95.2%,特異度100.0%）、55.5%（敏感度100.0%,特異度88.9%）、61.4%（敏感度84.2%,特異度100.0%）、54.2%（敏感度85.0%,特異度80.0%）。