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抗體保存是非常重要的,保存不好不僅影響質(zhì)量,而且關(guān)乎著實驗的成敗,給大家總結(jié)一下抗體保存的注意要點。
1.收到抗體后需先在12000 rpm離心 1-5分鐘,再打開管蓋進行分裝和保存,如果抗體體積不足50 ul,可延長離心時間至5分鐘,從而確??贵w全部離心下來。
2.對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在-2o℃或-8o℃,也可4℃短暫保存1-2周,并不影響抗體活性。
①對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-2O℃即可。如果抗體在2周內(nèi)會使用,推薦在4C保存,這是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害。如果要保存則在-2o℃或-80℃。當然關(guān)鍵的是按照說明書的推薦來進行保存。但是,腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存,因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,在4℃保存會導(dǎo)致抗體的降解。
②分裝可以程度的降低反復(fù)凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實驗用完為好,少不能少于10u1每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,需將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來。
③抗體工作液應(yīng)該當天配制當天用完,在4℃盡量不要超過1天。
④盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上。且避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。
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