ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用，ELISA試劑盒因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封閉。
   蛋白封閉液則有所不同，是*的。它們與開放位點(diǎn)結(jié)合并封閉，同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。
   ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟，ELISA試劑盒但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。
檢測試劑要適量
另一點(diǎn)也很顯而易見：切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導(dǎo)致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。