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試驗(yàn)前樣本和試劑盒室溫平行1小時(shí)，如果樣本是凍存樣本，應(yīng)提早拿到2-8攝氏度進(jìn)行凍結(jié)（不建議直接室溫凍結(jié)）
準(zhǔn)備好試驗(yàn)所需耗材，蒸餾水（去離子水）。
ELISA試劑盒操作流程描敘：
1.即將進(jìn)行試驗(yàn)的版孔進(jìn)行設(shè)定好，規(guī)范品5個(gè)點(diǎn)，每個(gè)點(diǎn)設(shè)定平行，需求用到10個(gè)孔，空白只需1個(gè)孔。剩下孔能夠做為樣本孔
2.稀釋規(guī)范，準(zhǔn)備好5個(gè)EP管，然后在每個(gè)EP管中參加150微升規(guī)范稀釋液，編上編碼，分別為1，2，3，4,5，在1號(hào)管中參加150規(guī)范品，用槍頭重復(fù)吹打10次左右（留意操控起伏不要過(guò)大簡(jiǎn)單發(fā)生氣泡）如果有渦旋儀能夠在渦旋儀上渦旋5秒左右，然后換槍頭，在1號(hào)管中取150微升參加到2號(hào)管，后面進(jìn)程一次類推。zui終稀釋完，前面4個(gè)管中每管液體在150微升，5號(hào)管為300微升。濃度是從大到小。
3.規(guī)范、樣本、空白加樣：規(guī)范是每個(gè)濃度點(diǎn)2個(gè)孔（做平行），每孔參加50微升，加樣進(jìn)程中留意換槍頭，樣本孔中每孔參加50微升，加樣進(jìn)程中留意換槍頭，空白孔參加50微升蒸餾水。特別要闡明的是，規(guī)范加樣和樣本加樣盡量操控在15分鐘內(nèi)加完，如果時(shí)刻拖的太長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致前面孔先反響后面孔才開(kāi)端反響，這樣數(shù)值誤差過(guò)大。加完樣后蓋上封板膜，至37攝氏度孵育30分鐘.
4.洗版，在孵育進(jìn)程中能夠?qū)⑾礈煲号浜茫?0ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或許去離子水定容到600ml即可。每孔參加250-300微升的洗滌液（不要漫過(guò)版孔），（如果有震動(dòng)儀的話，能夠講板子放入震動(dòng)儀上5秒左右，然后靜止三十秒，沒(méi)有請(qǐng)疏忽次進(jìn)程）將板子在桌子上晃動(dòng)5秒左右，然后靜置30秒，甩干，決定。闡明：甩干進(jìn)程盡量要快，1秒內(nèi)就能夠完結(jié)，不要漸漸歪斜倒掉液體，直接翻板甩掉液體即可。決定進(jìn)程需求在桌子上墊一層吸水紙或許濾紙，版孔朝下拍幾下，拍干差異主要看吸水紙和濾紙上沒(méi)有顯著的水漬為完結(jié)。
5.每孔參加50微升的酶標(biāo)試劑，此處在空白孔中不需求加（空白孔為空），孵育30分鐘。
6.洗版同進(jìn)程4
7.顯色，先每孔中參加50微升的顯色A液，然后每孔中參加50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘
8.停止，每孔參加50微升的停止液，留意，加完停止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù)，超越時(shí)刻讀數(shù)無(wú)效。在規(guī)則時(shí)刻內(nèi)讀數(shù)都是有用的。
至此，整個(gè)試驗(yàn)完畢
需求額外提示的是：在做完整個(gè)試驗(yàn)過(guò)儀器之前，儀器預(yù)熱半小時(shí)，這個(gè)計(jì)算好時(shí)刻，也能夠直接將儀器一向開(kāi)著，直到整個(gè)試驗(yàn)完畢。
ELISA試劑盒在加液進(jìn)程中不要使槍頭觸及到板子底部，一般槍頭都懸空，能夠?qū)岊^靠在孔邊緣，但槍頭尖懸空，如果槍頭上殘留液體看全體多少數(shù)，不要吹打下去。特別忌諱在版孔內(nèi)壁流向版孔。整個(gè)加液進(jìn)程不要發(fā)生氣泡。（洗滌液在外）