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ELISA試劑盒實踐過程操作技巧:
1)加樣器應垂直加入標本,避免刮擦包被板底部,加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上。
2)加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。
3)在進行實驗前應對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
4)顯色液量不可過多,加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應,顯色液量不能過多,以免顯色過強。
5)要保證加液量一致,在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準,造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤。
ELISA試劑盒實驗水浴保溫方法:
1、可將ELISA試板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。
2、為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,可讓反應板漂浮在水面上。
3、濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。
4、操作時的室溫應嚴格限制在規(guī)定的范圍內,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。
5、若用保溫箱,應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。
6、ELISA試劑盒室溫溫育時,只要平置于操作臺上即可。
7、無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
8、應注意溫育的溫度和時間應按規(guī)定力求準確。
9、為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
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