今日豐壽來介紹培養(yǎng)基和滅菌的操作以及步驟
 
  1.調(diào)理 pH 值
    用pH試紙(或 pH 電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì))測驗(yàn)培育基的pH值,如不契合需求,可用10%HCl或10%進(jìn)行調(diào)理, 直到調(diào)理到配方要求的pH值停止。
 
  2.分裝
    已過濾的培育基應(yīng)進(jìn)行分裝。 如果要制造斜面培育基, 須將培育基分裝于試管中。如果要制造平板培育基或液體、半固體培育基, 則須將培育基分裝于錐形瓶內(nèi)。
 
  3.過濾
    用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培育基過濾。用紗布過濾時(shí), 折疊成六層, 用濾紙過濾時(shí), 可將濾紙折疊成瓦棱形, 鋪在漏斗上過濾。
 
  4.制造溶液
    向容器內(nèi)參加所需水量的一部分, 按照培育基的配方, 稱取各種質(zhì)料, 順次參加使其溶解, zui終補(bǔ)足所需水分，對蛋白胨、肉膏等物質(zhì), 需加熱溶解, 加熱進(jìn)程所蒸騰的水分, 應(yīng)在悉數(shù)質(zhì)料溶解后加水補(bǔ)足。
制造固體培育基時(shí), 先將上述已配好的液體培育基煮沸, 再將稱好的瓊脂參加, 持續(xù)加熱至*消融. 并不斷攪拌, 防止瓊脂糊底燒焦。
 
  分裝時(shí), 一手捏松繃簧夾, 使培育基流出, 另一只手抓住幾支試管或錐形瓶, 順次接取培育基。分裝時(shí), 注意不要使培育基粘附管口或瓶口, 防止浸濕棉塞引起雜菌污染。
裝入試管的培育基量, 視試管和錐形瓶的巨細(xì)及需求而定. 一般制造斜面培育基時(shí), 每只 15×150 毫米的試管, 約裝 3～4 毫升 (1/4～1/3 試管高度), 如制造深層培育基, 每只 20×220 毫米的試管約裝 12～15 毫升。每只錐形瓶裝入的培育基, 一般以其容積的一半為宜。
 
  5.制造斜面培育基和平板培育基
培育基滅菌后, 如制造斜面培育基和平板培育基, 須趁培育基未凝結(jié)時(shí)進(jìn)行。
 
 (1)制造斜面培育基。在試驗(yàn)臺上放 1 支長 0.5～1 米左右的木條, 厚度為 1 厘米左右，將試管頭部枕在木條上, 使管內(nèi)培育基天然歪斜, 凝結(jié)后即成斜面培育基。
 
 (2)制造平板培育基。將剛剛滅過菌的盛有培育基的錐形瓶和培育皿放在試驗(yàn)臺上, 點(diǎn)燃酒精燈, 右手托起錐形瓶瓶底, 左手拔下棉塞, 將瓶口在酒精燈上稍加灼燒, 左手翻開培育皿蓋, 右手敏捷將培育基倒入培育皿中, 每皿約倒入 10 毫升, 以鋪滿皿底為度. 鋪放培育基后放置 15 分鐘左右, 待培育基凝結(jié)后, 再 5 個(gè)培育皿一疊, 倒置過來, 平放在恒溫箱里,24 小時(shí)后查看, 如培育基末長雜菌，即可用來培育微生物。
 
  6.加棉塞
    分裝結(jié)束后, 需求用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的首要意圖是過濾空氣, 防止污染. 棉塞應(yīng)選用普通新鮮、干燥的棉花制造, 不要用脫脂棉, 防止因脫脂棉吸水使棉塞無法運(yùn)用。制造棉塞時(shí), 要根據(jù)棉塞巨細(xì)將棉花鋪展成恰當(dāng)厚度, 揪取手掌心巨細(xì)一塊, 鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中, 用右手食指插入棉花中部, 一起左手食指與姆指稍稍緊握, 就會形成 1 個(gè)長棒形的棉塞. 棉塞作成后, 應(yīng)敏捷塞入管口或瓶口中, 棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙, 以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松, 塞好后, 以手提棉塞、管、瓶不下落為適宜。棉塞的 2/3 應(yīng)在管內(nèi)或瓶內(nèi), 上端露出少量棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札, 準(zhǔn)備滅菌。