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上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司

細(xì)胞線粒體膜電位變化的檢測(cè)

時(shí)間:2015-5-15閱讀:1234
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   在細(xì)胞凋亡的過程中往往伴隨著線粒體跨膜電位的破壞,這被廣泛認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程中zui早發(fā)生的事件之一。它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。線粒體跨膜電位的存在,使一些親脂性陽(yáng)離子熒光染料如 Rhodamine 123、JC-1、JC-10等可結(jié)合到線粒體基質(zhì),其熒光的增強(qiáng)或減弱說明線粒體內(nèi)膜電負(fù)性的增高或降低。 
 JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針,表現(xiàn)出電勢(shì)依賴性的積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);而凋亡細(xì)胞,線粒體跨膜電位去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,濃度降低,逆轉(zhuǎn)為發(fā)射綠色熒光的單體形式。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。JC-1的流式檢測(cè)是比較常見的一種方法。

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