日前，有位客戶在留言中問道：“做內(nèi)標(biāo)法，說用的是內(nèi)標(biāo)物，這個(gè)內(nèi)標(biāo)物和對(duì)照品和標(biāo)準(zhǔn)品有什么不同呢？"針對(duì)該問題，我公司做出了一個(gè)全盤解析：

*、什么是內(nèi)標(biāo)物？
將一個(gè)已知質(zhì)量，樣品中不含有雜質(zhì)的純物質(zhì)，加入至待測(cè)樣品溶液中，以此純物質(zhì)的量為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比測(cè)定待測(cè)組分的含量，該純物質(zhì)稱為內(nèi)標(biāo)物。

內(nèi)標(biāo)物需滿足下列要求：能*溶解于樣品中，且不與待測(cè)組分發(fā)生化學(xué)作用；峰位盡可能與待測(cè)組分的峰位靠近，但能與待測(cè)組分*分開（分離度R≥1.5）的純物質(zhì)。若得不到純品，必須預(yù)先測(cè)定其準(zhǔn)確含量，且雜質(zhì)峰不得干擾待測(cè)組分峰。

第二、ELIS試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)
測(cè)定的結(jié)果較為準(zhǔn)確，由于通過測(cè)量?jī)?nèi)標(biāo)物及被測(cè)組分的峰面積的相對(duì)值來進(jìn)行計(jì)算的，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內(nèi)標(biāo)法的缺點(diǎn)是操作程序較為麻煩，每次分析時(shí)內(nèi)標(biāo)物和試樣都要準(zhǔn)確稱量，有時(shí)尋找合適的內(nèi)標(biāo)物也有困難。 外標(biāo)法簡(jiǎn)便，但進(jìn)樣量要求十分準(zhǔn)確，要嚴(yán)格控制在與標(biāo)準(zhǔn)物相同的操作條件下進(jìn)行，否則造成分析誤差，得不到準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果。

第三、ELIS試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)物需滿足的條件
內(nèi)標(biāo)法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)的一種方法，它在加入內(nèi)標(biāo)后，按峰面積歸一法的分析方法進(jìn)行分析，這就避免了由于進(jìn)樣的一致性及樣品歧視效應(yīng)導(dǎo)致的偶然誤差，因而，它的分析精密度也是比較高的，是氣相色譜的一種比較理想的定量分析方法。它的弱點(diǎn)是前處理比較復(fù)雜，所花費(fèi)的時(shí)間也比較長(zhǎng)，同時(shí)必須要有合適的標(biāo)樣及內(nèi)標(biāo)物才能進(jìn)行內(nèi)標(biāo)法定量分析。對(duì)于內(nèi)標(biāo)法定量分析來說，內(nèi)標(biāo)物的選擇是及其重要的。

它必須滿足如下的條件：
① 內(nèi)標(biāo)物與被分析物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)要相似；
② 內(nèi)標(biāo)物應(yīng)能*溶解于被測(cè)樣品（或溶劑）中，且不與被測(cè)樣品起化學(xué)反應(yīng)；
③ 內(nèi)標(biāo)物的出峰位置應(yīng)該與被分析物質(zhì)的出峰位置相近，且又不共溢出，目的是為了避免GC的不穩(wěn)定性所造成的靈敏度的差異；
④ 選擇合適的內(nèi)標(biāo)物加入量，使得內(nèi)標(biāo)物和被分析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應(yīng)值區(qū)域而導(dǎo)致的靈敏度偏差。

第四、ELIS試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作
① 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品，制成混合標(biāo)樣，并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣?；旌蠘?biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。
② 注入色譜柱，以（標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積）為響應(yīng)值。
③ 根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。
④ 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測(cè)組分的響應(yīng)值。
⑤ 根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測(cè)組分的濃度。

第五、ELIS試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的特點(diǎn)
操作過程中樣品和內(nèi)標(biāo)是混合在一起注入色譜柱的，因此只要混合溶液中被測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)的量的比值恒定，上樣體積的變化不會(huì)影響影響定量結(jié)果。
內(nèi)標(biāo)法抵消了上樣體積，乃至流動(dòng)相、檢測(cè)器的影響，因此比外標(biāo)法。