通常均選用水浴，可將大鼠ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA檢查試劑盒板應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui終將ELISA檢查試劑盒板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。

    無論是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響，操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)厲約束在規(guī)則的范圍內(nèi)，規(guī)范室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求操控溫育。室溫溫育時，大鼠ELISA試劑盒板只需平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時刻應(yīng)按規(guī)則力求。為確保這一點(diǎn)，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板一起測定。ELISA檢查試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被為例，參加板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有均等的和固相抗的時機(jī)，只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐步平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)分散才干到達(dá)反響的結(jié)尾。在這以后參加的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的也相同如此。這即是為何ELISA檢查試劑盒反響老是需求必定時刻的溫育。 

     溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。37℃是試驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體的適宜溫度。在樹立ELISA辦法作反響動力學(xué)研討時，試驗(yàn)標(biāo)明，兩次抗原抗體反響通常在37℃經(jīng)1-2小時，產(chǎn)品的生成可達(dá)。為加快反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度?？乖贵w反響4℃更為*，在放射中多使反響在冰箱中過夜，以構(gòu)成zui多的沉積。但因所需時刻太長，在大鼠ELISA試劑盒中通常不予選用。