中性-蛋白酶(NP)測(cè)試盒_蛋白-酶系列
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意： 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
NP在一定的溫度和中性pH條件下，催化水解蛋白質(zhì)。由于其安全無(wú)毒、水解能力強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，中性-蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營(yíng)養(yǎng)保健品生產(chǎn)。
中性-蛋白酶(NP)測(cè)試盒_蛋白-酶系列
測(cè)定原理：
中性條件下，NP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪-氨酸；在堿性條件下，酪-氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm有特征吸收峰。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體90mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加10 mL蒸餾水溶解。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入20 mL試劑一，沸水浴中磁力攪拌溶解。（可在燒杯上蓋一層保鮮膜，注意觀察，避免水分全部蒸發(fā)，一般加熱15-30分鐘，該試劑為過(guò)飽和試劑，充分混勻后仍出現(xiàn)顆粒物不溶物不影響使用）。
試劑四：粉劑×1瓶， 4℃保存。臨用前加50 mL蒸餾水溶解。
試劑五：液體10mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，0.25 μ mol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪-氨酸溶液，4℃保存。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即粗酶液。
2.血清或培養(yǎng)液：直接測(cè)定。
3.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
環(huán)保在線