競爭抑制法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。以測定抗原為例。
競爭抑制法的原理
小分子抗原或半抗原缺乏可作雙抗體夾心法的2個(gè)或2個(gè)以上位點(diǎn)，可用競爭法測定。其原理是將待檢抗原和酶標(biāo)抗原與相應(yīng)固相抗體競爭結(jié)合，標(biāo)本中抗原越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原越少，與底物反應(yīng)生成的顏色越淺，因此根據(jù)顏色深淺可定量測定。
將特異性抗體吸附于固相載體；加入待測抗原和一定量的酶標(biāo)已知抗原，使二者競爭與固相抗體結(jié)合；經(jīng)洗滌分離，zui后結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原與待測抗原含量呈負(fù)相關(guān)。
競爭抑制法的操作步驟
1、用已知特異性抗體包被固相載體（微孔板），形成固相抗體，洗滌除去未結(jié)合物；
2、測定孔加入待檢樣品和一定量的酶標(biāo)抗原，經(jīng)過溫育，使兩者與固相抗體競爭結(jié)合；對照孔只加一定量酶標(biāo)抗原與固相抗體直接結(jié)合。分別洗滌，除去未結(jié)合到固相上的游離酶
標(biāo)抗原及其他未結(jié)合物；
3、加底物顯色，對照孔由于只加酶標(biāo)抗原，與固相抗體充分結(jié)合，故分解底物顯色深；測定孔的顯色程度則隨待測抗原和酶標(biāo)抗原與固相抗體競爭結(jié)合的結(jié)果而異。如測抗原量多
，競爭性地抑制酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合，使固相上結(jié)合的酶標(biāo)抗原量減少。因此，加入底物后顯色反應(yīng)較弱。即顏色深淺與待測抗原量成反比。分別測定各孔的光密度（OD）值，根據(jù)對照孔與測定孔OD值之比，計(jì)算標(biāo)本中待測抗原含量。
同理，也可用固相抗原和酶標(biāo)抗體做試劑，使固相抗原和標(biāo)本中的待檢抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)抗體。待檢抗原競爭抑制酶標(biāo)抗體和固相抗原結(jié)合，即待檢抗原越多，顯色越淺。
測定抗體的競爭法和測定抗原的競爭法類似，是包被已知抗原，讓待檢抗體與酶標(biāo)抗體與之競爭結(jié)合，加底物顯色。待檢抗體越多，顏色越淺；待檢抗體越少，顏色越深。
競爭抑制法的應(yīng)用
抗HBc，抗pres2，抗HAV，抗HDV等。
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