產(chǎn)品名稱:小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa試劑盒
產(chǎn)品用途:科研實驗
公司服務(wù):免費代測
產(chǎn)品規(guī)格:48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa試劑盒*標記抗體的稀釋方法:
打開瓶蓋前請離心,收集瓶壁上的溶液。臨用前以*標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl*標記抗體加990μl*標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
“小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa試劑盒"間接法步驟:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
6.zui后一遍用DDW洗滌。
7.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
8.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
9.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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