產品簡介：
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色，簡稱 HE 染色，是病理學常規(guī)制片中zui
基本的染色方法，應用極其廣泛。蘇木精是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的
結晶，是一種堿性染色劑，它在被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)
一起使用，能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學和科研工作中，常用 HE 染色對正常組織
和病變組織進行形態(tài)結構觀察。對于確定或鑒別病變組織、細胞中出現(xiàn)的某些異常物質不特
殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學方法、免疫組織化學方法等也均是在觀察
HE 染色組織切片的基礎上進行的。在 HE 染色的組織切片中，細胞核呈藍色，細胞漿呈紅
色，二者形成鮮明的對比，易于觀察分析。
Leagene 蘇木素伊紅染色液中，*采用 Leagene 自主研發(fā)的配方，由進口
的高純度蘇木精、氧化劑等組成，不含甲醇等有害物質，對細胞核染色效果好。其
特點是丌易產生沉淀和金屬; 應用范圍廣，可以用于人、動物、畜牧、水產等領域，可以用
于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細胞的染色等；*可以重復使用。
染色原理：
1、 細胞核染色的原理：
蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是 DNA，在 DNA
雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使 DNA 雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸
性，很容易不帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性
溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。
2、 細胞漿染色的原理：
伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是
蛋白質，為兩性化合物，細胞漿的染色不染液的 pH 值密切相關。當染色液 pH 值在胞
漿蛋白質等電點(4.7～5.0)以下時，胞漿蛋白質以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可
被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，不胞漿蛋白質帶正
電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。
3、 分化作用：
染色后，用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所
用的溶液稱為分化液。在 HE 染色中常用 1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素
的醌型結構，使組織不色素分離而退色。大多數(shù)組織經蘇木素染色后，必須用 1%鹽酸
乙醇分化，使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊
紅染色，才能保證細胞核不細胞漿染色的分明。
4、 返藍作用：
分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍色
離子狀態(tài)，呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切
片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色，這個過程稱為返
藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。
產品組成：
自備材料：
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍化液，如稀氨水、*溶液等
3、等系列乙醇
4、4%多聚甲醛
操作步驟 (僅供參考) ：
(一)石蠟切片染色
1、 切片脫蠟至水
①? 二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。
②? (可選)無水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。
③? 95%的乙醇 3～5min
④? 90%的乙醇 3～5min
⑤? 80%的乙醇 3～5min
⑥? 自來水或蒸餾水沖洗 1～3min
2、染色
①? Leagene *染色 5～8min
②? 自來水或蒸餾水沖洗 5～10s
③? (可選)鹽酸乙醇分化 2～5s
④? 自來水沖洗 20～30s
⑤? 藍化液返藍 20～40s
編號
名稱
DH0006 DH0006 Storage
試劑(A): Leagene * 100ml 500ml RT 避光
試劑(B): 伊紅染色液 100ml 500ml RT 避光
使用說明書 1 份
⑥? 自來水沖洗 30～60s
⑦? 伊紅染色液染色 3～5min
⑧? 自來水沖洗 1～5s
2、脫水、透明、封固
①? 80%乙醇 10～20s
②? 90%乙醇 10～20s
③? 95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。
④? 無水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。
⑤? 二甲苯透明 3 次，每次 2～3min。
⑥? 中性樹脂封片。
染色結果：細胞核呈藍色；細胞質、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質等呈深淺丌一的紅色；
角蛋白、紅細胞等呈明亮的橙紅色。
(二)冰凍切片染色
1、乙醚-乙醇混合固定液 5～10s
2、自來水沖洗 2～5s
3、Leagene *滴染 1～2min(可加熱至 50℃)。
4、自來水沖洗 2～5s
5、(可選) 鹽酸乙醇分化 2～5s
6、自來水沖洗 2～5s
7、藍化液返藍 2～5s
8、自來水沖洗 5～10s
9、伊紅染色液染色 2～5s
10、自來水沖洗 1～2s
11、80%的乙醇 1～2s
12 、95%的乙醇 1～2s
13、無水乙醇 2～5s
14、*二甲苯(1:3) 2～5s
15、二甲苯透明 3 次，每次 2～5s。
16、中性樹脂封片
備選方案：
1、 無需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗 2～3min.
2、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
染色結果：細胞核呈藍色；細胞質、纖維呈紅色。
(三)細胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10～20min。
2、自來水沖洗 2 次，每次 2min。
3、 蒸餾水沖洗 2 次，每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，作用時間應相應縮短。
染色結果：細胞核呈藍色；細胞質、纖維呈紅色。
注意事項：
1、 切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經常更換新液。
2、 鹽酸乙醇分化時間應根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定，另外分化后自來水沖洗時
間應該足夠，以便*清洗酸。
3、 乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和 95%乙醇等量混合而得，再加入適量乙酸，密閉保存。
4、 冷凍切片染色時間盡量要短。
5、 藍化液常使用 0.2～1%氨水或 Scott 促藍液或 0.1～1%*溶液。
6、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 個月有效。
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