ELISA試劑盒技能原理：以免疫學(xué)反響為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反響與酶對底
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。
2. 結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍堅持其免疫學(xué)活性。
3. 酶符號的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體外表的抗原或抗體起反響。再參加酶符號 的抗原或抗體，也經(jīng)過反響而結(jié)合在固相載體上。
5. 此刻固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。
6. 參加酶反響的底物后，底物被酶催化變成有色產(chǎn)品，產(chǎn)品的量 與標本中受檢物質(zhì)的量直接有關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定辦法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），而且重復(fù)性好。
ELISA試劑盒樣本處理及請求：
1. 血清：室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘，離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清，保留過程中如呈現(xiàn)沉積，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的請求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清，保留過程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)當再次離心。
3. 尿液：用無菌管搜集，離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清，保留過程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢查分泌性的成份時，用無菌管搜集。離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清。檢查細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度到達100萬/ml擺布。經(jīng)過重復(fù)凍融，以使細胞損壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5. 安排標本：切開標本后，稱取分量。參加必定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標本消融后依然堅持2-8℃的溫度。參加必定量的PBS（PH7.4），用手藝或勻漿器將標本勻漿充沛。離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細心搜集上清。分裝后一份待檢查，其他冷凍備用。
6. ELISA試劑盒標本收集后盡早進行獲取，獲取按有關(guān)文獻進行，ELISA試劑盒獲取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立刻進行實驗，可將標本放于-20℃保留，但應(yīng)防止重復(fù)凍融。