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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>酶聯(lián)生物:試驗時怎么挑選到適合試驗的抗體呢?
一、關(guān)于特異性的挑選:特異性的挑選首要需求考慮四個方面:蛋白特異性、種屬特異性、試驗辦法特異性、符號物的特異性。
1、抗體蛋白特異性:針對需求檢測的蛋白查找抗體,幾個細(xì)節(jié)要差異,重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測,對抗體的要求是不相同的,留心檢查抗體說明書的檢測說明。假定重組蛋白不是全長表達(dá),則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。
2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異?,F(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,依據(jù)蛋白的同源性的狀況與其他種屬發(fā)作交叉反響。需求參照說明書注明的可反響種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以通過蛋白的序列比對,挑選同源序列免疫的抗體。
3、試驗辦法特異性:現(xiàn)在運用抗體的試驗辦法有許多,不同的運用辦法過程中,因為對蛋白樣品的處理辦法不相同,蛋白的含量有差異,對抗體的辨認(rèn)表位和效價要求都是不相同的。具體的依據(jù)說明書注明的產(chǎn)品應(yīng)用辦法進行挑選。
4、抗體符號物的特異性一般依據(jù)試驗操作的試驗辦法不會運用帶有符號的一抗,比如WB、IHC等,都是通過二抗類的試劑符號抵達(dá)效果出現(xiàn)的意圖。可是依據(jù)儀器剖析的一些試驗,或許就會運用到直接符號的一抗,比如流式試驗。
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