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當前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術文章>>今日課堂:小細胞之大微妙
1.收到細胞,時間要鏡檢:調查細胞形態(tài)是否正常,關于貼壁細胞則要注意看貼壁狀況是否很好,調查細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術人員。因為運送的時間或許溫度的變化,許多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里成長的狀況平和時會有點不一樣,主要是貼壁結實問題。
2.當通過上一步的調查,細胞初步?jīng)]有任何問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密到達80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的慣例培養(yǎng)基;或替換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天調查。細胞在低于正常成長溫度狀況下,會調整為停止期,或許慢速成長期,必須恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,才干重新調整到接近對數(shù)成長期的狀況,在對數(shù)成長期進行細胞的傳代會大大添加傳代的成功率,和細胞的存活率。
3.如果經(jīng)步調查發(fā)現(xiàn)細胞密度超越90%,而且細胞狀況很好時,則復溫后2個小時需求立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。關于成長比較快,狀況安穩(wěn),不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶。
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