酶聯(lián)免疫試驗(yàn)簡(jiǎn)稱Elisa試驗(yàn)，是elisa試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)中要害的一步，稍有不小心將導(dǎo)致試驗(yàn)滿盤(pán)皆輸，怎么安全，便利的處理樣本，接下來(lái)我公司就和大家共享樣本處理的辦法

1. 融解RIPA裂解液，混勻。取恰當(dāng)量的裂解液，在運(yùn)用前數(shù)分鐘內(nèi)參加PMSF，使PMSF的*終濃度為1mM。

2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(假如血清中的蛋白沒(méi)有干擾，能夠不洗)。依照6孔板每孔參加150-250微升裂解液的比例參加裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充沛觸摸。一般裂解液觸摸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
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3. 充沛裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

對(duì)于安排樣品：

1. 把安排剪切成細(xì)小的碎片。

2. 融解RIPA裂解液，混勻。取恰當(dāng)量的裂解液，在運(yùn)用前數(shù)分鐘內(nèi)參加PMSF，使PMSF的*終濃度為1mM。

3. 依照每20毫克安排參加150-250微升裂解液的比例參加裂解液。(假如裂解不充沛能夠恰當(dāng)增加更多的裂解液，假如需要高濃度的蛋白樣品，能夠恰當(dāng)減少裂解液的用量。)

4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充沛裂解。

5. 充沛裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6. 假如安排樣品本身非常細(xì)小，能夠恰當(dāng)剪切后直接參加裂解液裂解，經(jīng)過(guò)激烈vortex使樣品裂解充沛。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)試驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較便利，不必運(yùn)用勻漿器，缺陷是不如運(yùn)用勻漿器那樣裂解得比較充沛。