*Andrographis paniculata(Burm．．廠)Nees又 名欖核蓮、一見喜等，為爵床科植物，原產(chǎn)于菲律賓、印 度、斯里蘭卡、泰國等熱帶地區(qū)，20世紀(jì)50年代由華僑 引入我國廣東、福建栽培，后北移至陜西、北京、四川等 地。*以全草入藥，其藥用有效成分為*內(nèi) 酯、脫氧*內(nèi)酯和新*內(nèi)酯等，統(tǒng)稱*總 內(nèi)酯。具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌、抗心血管疾病 等作用 ，為臨床常用藥，是抗病毒的藥物之一。 臨床上以*內(nèi)酯制成制劑較多，本文對*內(nèi) 酯的基本理化性質(zhì)進(jìn)行了考察，測定了其在水相、油相 及不同溶出介質(zhì)中的溶解度，為*內(nèi)酯臨床制劑 的研究提供理論依據(jù)。
1 儀器與試藥
液相色譜儀(戴安Dionex summit P680，檢測器Dionex UVD170U)；電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械 五廠)；BP110S天平(德國Sartorius公司，d=0．1 mg)； 超聲波清洗機(jī)(中船七院七二六所)。
*內(nèi)酯對照品(中國藥品生物制品檢定所， 批號：1 10797—200307)；*內(nèi)酯提取物(桂林 市三棱生物制品有限公司，2004．12)；甘油(廣東遠(yuǎn) 濠精細(xì)化學(xué)品公司)；丙二醇(廣東新寧化工廠)； 油酸乙酯(中國飛祥化工廠)；大豆油、茶油(江西金 海棠藥用油有限公司)；氯仿(天津市百世化工有限 公司)；甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇(廣東光華化 學(xué)廠有限公司)；HC1、氯化鈉、NaOH(天津天泰精細(xì) 化學(xué)品有限公司)；KH：PO (天津石英鐘廠霸州市化 工分廠)；甲醇為色譜純(Dikma Pure)；其它試劑均 為分析純。
2 方法和結(jié)果
2．1 *內(nèi)酯工作曲線的測定
2．1．1 色譜條件色譜柱：Diamonsil C】8(5 p,m，250 mm X 4．6 mm)；流動相：甲醇一水(60：40)；柱溫： 35oC；流速：l ml／min；檢測波長：225 nm；采用20 l定 量環(huán)進(jìn)樣。
2．1．2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：精 密稱取*內(nèi)酯對照品5．16 mg，加甲醇溶解并定容 至25 ml，制備成濃度為0．2 mg／ml的對照品溶液，再用 甲醇稀釋至1／2、1／4、1／5、1／8、1／16倍濃度，參照2．1．1 方法，在zui大波長225 nm處測定峰面積，以峰面積(y) 與對照品濃度( )作線性回歸，回歸方程為：Y= 688．67 +1．7332，r=0．9998；濃度C(mg／mt)在 0．2064—0．0129 mg／ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。低、中、 高3種不同濃度*內(nèi)酯提取物溶液的平均回收率 分別為100．3％ ，100．1％ ，99．5％ ，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值 (RSD)分別為1．0％ ，1．3％ ，0．8％ ，低、中、高3個濃度 的El間差和日內(nèi)差RSD均<2％ 。
2．2 樣品溶液的處理
2．2．1 *內(nèi)酯不同溫度下在水中的溶解度 選擇5個溫度條件，室溫(22。I=)、30℃、37℃ 、40℃、 45℃。每個溫度條件下做3份平行樣。均稱量過量穿 心蓮內(nèi)酯提取物溶于25 IIll蒸餾水，放置在不同溫度下 的恒溫振蕩器中靜置22 h。前12 h每隔3 h振蕩10 rain，使之充分達(dá)到溶解平衡。22 h后吸取上清液7 IIll，用甲醇稀釋至l0 IIll。整個過程控制在恒溫狀態(tài)， 過0．45 m濾膜，用HPLC測定。結(jié)果見表1。
2．2．2 在不同pH值下的溶解度選擇3種介質(zhì)：O．1 mol／L的HC1，pH6．8的磷酸鹽緩沖液，pH7．6的磷酸鹽緩沖液。每份樣品做3個平行樣。取不同溶解介質(zhì) 25 rnl，加人過量的*內(nèi)酯提取物，放置在恒溫振蕩 器中，水浴37~C中靜置。前12 h每隔3 h振蕩10 min， 使之充分達(dá)到溶解平衡。22 h后吸取上清液過0．45 m微孔濾膜，用HPLC測定，結(jié)果見表2。
2．2．3 *內(nèi)酯在有機(jī)相中溶解度取正丁醇、乙酸 乙酯、油酸乙酯、氯仿、丙二醇、甘油、甲醇、乙醇各3份， 加人*內(nèi)酯提取物至過飽和，振搖混勻，于37℃恒 溫水浴箱中保溫12 h后取出，使之充分達(dá)到溶解平衡。 于室溫下放置4 h，分別取出適量，用甲醇稀釋至一定體 積，過0．45 微孔濾膜，用HPLC測定，結(jié)果見表3。
2．2．4 *內(nèi)酯在油相中溶解度稱取過量的穿 心蓮內(nèi)酯提取物于l5 rnl具塞試管中，分別加入10 ml 大豆油、茶油，渦旋混勻，再于37℃ 恒溫水浴箱中振蕩 24 h，使之充分達(dá)到溶解平衡。取出靜置1 h，取上清液 5 ml，離心10 min(3500 r／min)。離心后取上清液，用 甲醇萃取，合并萃取液。取萃取液1 ml，置10 lIll量瓶 中，甲醇定容至刻度。過0．45 m微孔濾膜，用HPLC 測定，結(jié)果見表4。
2．2．5 *內(nèi)酯在不同濃度SDS溶液中的溶解度 取0．2％ 、0．3％ 、0．4％ 、0．5％ 、0．6％ 、0．8％ 十二烷基 硫酸鈉(SDS)水溶液以及蒸餾水15Ⅱd各3份，加入穿 心蓮內(nèi)酯提取物至過飽和，振搖混勻，于37℃水浴中保 溫36 h后，使之充分達(dá)到溶解平衡。取出適量過0．45 m濾膜，得濾液，立即用甲醇稀釋。其中SDS水溶液 的樣品處理方法是：取濾液5 IIll，用甲醇稀釋至25 ml； 蒸餾水的樣品處理方法是：取濾液5 IIll，用甲醇稀釋至 l0 IIll。待HPLC測得各樣品中*內(nèi)酯的含量，計(jì) 算出*內(nèi)酯在水中與不同濃度SDS溶液中的溶解 度，結(jié)果見表5。
2．3 測定結(jié)果
3 討論
3．1 不同溫度下*內(nèi)酯在水中溶解度 室溫(22cc)：0．069 ms／ml，30℃ ：0．059 mg／ml， 37oC：0+072 mg／ml，40oC：0．082 mg／ml，45qC：0．103 mr,／ml?？梢?/span>*內(nèi)酯在水中的溶解度非常小，但水 中溶解度隨著外界溫度的升高而增大。
3．2 *內(nèi)酯在不同pH值溶液中溶解度 測得37℃ 下，在0．1 mol／L的鹽酸：0．050 ms／ml； 在pH6．8的磷酸鹽中：0．045 mg／ml；在pH7．6的磷酸 鹽中：0．046 ms／ml。溶解度均非常小，且相差不明顯。
3．3 *內(nèi)酯在有機(jī)溶劑、油相中的溶解度 在有機(jī)溶劑中的溶解度以在甲醇中溶解度zui高， 油相中的溶解度是水相中的50多倍，這為*內(nèi)酯 制劑研究的處方篩選提供了依據(jù)。
3．4 *內(nèi)酯在不同濃度SDS水溶液中的溶解度 0．5％SDS中的溶解度是水溶液中溶解度的5倍。
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