染色特異性和敏感性的測(cè)定方法

（1）特異性染色和效價(jià)測(cè)定

直接染色法中效價(jià)以倍比稀釋如1：2、1：4、1：8……，與相應(yīng)抗原標(biāo)本作一系列染色，熒光強(qiáng)度在“+++"的zui大稀釋度，為其染色滴度（效價(jià)）或單位。實(shí)際染色時(shí)，可取低一個(gè)或兩個(gè)稀釋度（即2~4個(gè)單位），如染色效價(jià)為1：64，實(shí)際應(yīng)用時(shí)可取1：32或1：16。間接染色法中效價(jià)可按抗核抗體熒光染色法步驟，先用不同稀釋度的熒光抗體染色，結(jié)果以抗核抗體熒光強(qiáng)度“++"為標(biāo)準(zhǔn)，染色用效價(jià)和直接法相同。

（2）非特異性染色測(cè)定

根據(jù)熒光抗體的用途不同，可用類似的抗原切片或涂片，倍比稀釋熒光抗體，按常規(guī)染色，結(jié)果在標(biāo)本上出現(xiàn)的非特異染色應(yīng)顯著低于特異性染色，否則應(yīng)采取消除非特異性染色的方法處理熒光抗體。

（3）吸收試驗(yàn)

在熒光抗體中加入過量相應(yīng)抗原，于室溫中攪拌2h后，移入4℃冰箱過夜，3000r/min，離心30min，收集上清液，再用于相應(yīng)抗原陽性標(biāo)本染色，結(jié)果應(yīng)不出現(xiàn)明顯陽性熒光。