TM-PEK是一種新穎的膜蛋白制備試劑盒。它是用基于化學(xué)而非去污劑的方法來(lái)抽提膜蛋白，不需要超聲破碎、劇烈震蕩、超速離心或高溫孵育，這樣，目的蛋白受損的幾率就大大降低。而得到的蛋白組分適用于各種常見(jiàn)的蛋白分析，如活性分析、天然和變性的凝膠電泳、Western Blot、免疫沉淀和質(zhì)譜等等。

    膜蛋白通過(guò)許多疏水氨基酸殘基錨定在膜結(jié)構(gòu)里面，因而很難溶解在水性緩沖液系統(tǒng)中。為了制備膜蛋白樣品，傳統(tǒng)的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。但去污劑處理會(huì)使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu)，妨礙了膜蛋白的功能研究。

    TM-PEK的抽提方法也很簡(jiǎn)單，只有兩步。*步，利用抽提緩沖液1來(lái)透化細(xì)胞或勻漿的組織，通過(guò)離心將可溶（胞質(zhì)）組分與不可溶（膜）組分分離開(kāi)。第二步，利用抽提緩沖液2A或2B將膜蛋白從脂雙層中抽提出。抽提緩沖液2A與2B的區(qū)別在于主角不同，分別為T(mén)M-PEK試劑A和TM-PEK試劑B，不過(guò)Novagen并沒(méi)有說(shuō)明這兩者的具體成分。抽提緩沖液2A非常溫和，適于脆弱的蛋白復(fù)合物。相比之下，2B則更為，適用于那些難對(duì)付的跨膜蛋白，特別是有多個(gè)跨膜區(qū)的頑固分子。哪怕是有7個(gè)跨膜區(qū)的Frizzled-4蛋白也能輕松搞定。你可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)摸索，根據(jù)目的蛋白的特點(diǎn)和下游應(yīng)用來(lái)二選一。