微核與染色體損傷有關(guān)，是染色體或染色單體的無著絲點(diǎn)斷片或紡錘絲受損傷而丟失的整個(gè)染色體，在細(xì)胞分裂后期在細(xì)胞質(zhì)中，末期之后，單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核，包含在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，因其比主核小，故稱微核。

    微核試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，容易觀察，具有分裂能力的培養(yǎng)細(xì)胞均可用于顯示微核。選擇細(xì)胞較大，細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞質(zhì)完整的雙核淋巴細(xì)胞，微核游離于細(xì)胞質(zhì)中與主核*分開，著色與主核一致或略淺，大小為主核的1／3以下。一般需要計(jì)數(shù)2000個(gè)細(xì)胞。

一、實(shí)驗(yàn)材料

1．受試材料人外周血。

2．RPMll640培養(yǎng)，含20％小牛血清。

3．KCl低滲液 配制75mmol／L KCl水溶液。

4．固定液(甲醇：冰醋酸一3：1)。

5．Glemsa染液。細(xì)胞

6．松胞素(Cyt—B)6μg／ml。

二、實(shí)驗(yàn)方法

1．常規(guī)外周血37℃培養(yǎng)96小時(shí)，不加秋水仙素。

2．將培養(yǎng)物移人離心管中，1000r／min，離心8min，棄上清液。

3．每管加入75mmol／L KCl溶液3ml，37℃低滲處理3min。

4．每管加入甲醇冰醋酸(3：1)固定液l ml，輕輕打勻預(yù)固定。

5．1200r／min，離心8min，棄上清液。

6．每管加上述固定液3 ml，置室溫固定：3min。

7．1000 r/min，離心8min，棄上清液加少許固定液混勻滴片。

8．10％Giernsa染色10min。

三、結(jié)果分析

微核計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)：

1．微核著色深淺與主核相同。

3．位于胞漿內(nèi)。細(xì)胞

4．與主核不連接(以區(qū)別主核的突起)。