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南京信帆生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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糖原含量檢測(cè)試劑盒真的太好用了!

時(shí)間:2018-3-30閱讀:3923
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糖原含量檢測(cè)試劑盒真的太好用了!

糖原(glycogen)(C24H42O21)是一種動(dòng)物淀粉,又稱(chēng)肝糖或糖元,由葡萄糖結(jié)合而成的支鏈多糖,其糖苷鏈為α型。是動(dòng)物的貯備多糖。
哺乳動(dòng)物體內(nèi),糖原主要存在于骨骼肌(約占整個(gè)身體的糖原的2/3)和肝臟(約占1/3)中,其他大部分組織中,如心肌、腎臟、腦等,也含有少量糖原。低等動(dòng)物和某些微生物(如:真菌)中,也含有糖原或糖原類(lèi)似物。糖原結(jié)構(gòu)與支鏈淀粉相似。

物質(zhì)簡(jiǎn)介:

糖原貯藏于肝細(xì)胞及肌細(xì)胞漿中,其形狀為大小不等的顆粒,遇碘則變褐色,易溶于水,機(jī)體壞死后,糖原即受到破壞,因此須采取新鮮標(biāo)本,并及時(shí)固定。糖原不等于糖類(lèi),只是糖類(lèi)的一種。糖類(lèi)從組織化學(xué)技術(shù)的角度分類(lèi)與生物化學(xué)的分類(lèi)并非一致。從組織化學(xué)的角度,糖類(lèi)可略分為多糖、中性糖液物質(zhì)和酸性粘液物質(zhì)及粘蛋白和粘脂質(zhì)。多糖主指糖原,是由許多葡萄糖分子以糖苷鍵組成的聚合體。當(dāng)機(jī)體死亡,即很快分解為葡萄糖。
動(dòng)物和細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)貯存的多糖,*由葡萄糖組成。在動(dòng)物體內(nèi)以肝臟和骨骼肌中儲(chǔ)量zui豐富,與淀粉在植物中的作用相當(dāng)。糖原在體內(nèi)酶促作用下的合成和分解可維持血糖正常水平,細(xì)菌中糖原用于供能和供碳。干燥狀態(tài)下為白色無(wú)定形粉末,無(wú)臭,有甜味。與碘顯棕紅色,在430-490nm下呈現(xiàn)zui大光吸收。部分溶于水而成膠體溶液,不溶于乙醇。結(jié)構(gòu)與支鏈淀粉相似,主要是α-D-葡萄糖,按α(1→4)糖苷鍵縮合失水而成,另有一部分支鏈通過(guò)α(1→6)糖苷鍵連接。用細(xì)算后淀粉酶水解時(shí)生成麥芽糖和葡萄糖??捎?0%氫氧化鈉處理動(dòng)物肝臟,再加乙醇沉淀制備。

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測(cè)定意義:

糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖,是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱(chēng)為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度,當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原,血糖降低時(shí),肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此,肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí),肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過(guò)糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>

測(cè)定原理:

蒽酮法。利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原,在強(qiáng)酸性條件下利用蒽酮顯色劑測(cè)定糖原含量。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、濃硫酸(不允許快遞)和蒸
餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:0.1mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶, 4℃保存;

信帆生物對(duì)質(zhì)量的控制涵蓋生物試劑、放行、市場(chǎng)質(zhì)量反饋的全過(guò)程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過(guò)程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗(yàn)和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場(chǎng)不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品的度、穩(wěn)定性。我們確保銷(xiāo)售給客戶(hù)的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶(hù)要求的產(chǎn)品。

糖原提?。?/strong>

1﹑細(xì)胞或細(xì)菌:收集500~1000 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;加入0.75mL 提
取液超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30 次);轉(zhuǎn)移至
10mL 試管中,95℃水浴20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混
勻;取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液待測(cè)。

2﹑組織:稱(chēng)取0.1~0.2g 樣品,加入0.75ml 提取液充分勻漿;轉(zhuǎn)移至10ml 試管中;95℃水
浴20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混勻;待組織全部溶解后,
取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液待測(cè)。

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