ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，Sam Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，Sam Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

Sam Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。Sam Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，Sam Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，Sam Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

Sam Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA575Hu    人胃動(dòng)素(MTL)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Motilin (MTL)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA876Hu    人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA875Hu    人碳酸酐酶Ⅰ(CA1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Carbonic Anhydrase I (CA1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA469Hu    人內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Lipase, Endothelial (LIPG)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA800Hu    人妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA399Hu    人高遷移率族蛋白1(HMG1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA397Hu    人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta ReHZptor I (TGFbR1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA396Hu    人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA395Hu    人抑制素A(INHA)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Inhibin A (INHA)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA580Hu    人水通道蛋白2(AQP2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 2, Collecting Duct (AQP2)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA578Hu    人水通道蛋白9(AQP9)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 9 (AQP9)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA379Hu    人胰島素原(PI)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Proinsulin (PI)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA807Hu    人巖藻糖苷酶αL1(FUCα1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA557Hu    人甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Thyroid Peroxidase (TPO)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA380Hu    人血管活性腸肽(VIP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA393Hu    人P物質(zhì)(SP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for SubstanHZ P (SP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA902Hu    人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA386Hu    人脂蛋白脂酶(LIPD)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Lipase, Lipoprotein (LIPD)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA821Hu    人C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA794Hu    人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA606Hu    人腦紅蛋白(NGB)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Neuroglobin (NGB)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA607Hu    人食欲素A(OXA)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Orexin A (OXA)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA579Hu    人水通道蛋白1(AQP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 1, Colton Blood Group (AQP1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA581Hu    人水通道蛋白3(AQP3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 3, Gill Blood Group (AQP3)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA582Hu    人水通道蛋白4(AQP4)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 4 (AQP4)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml