ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，SAA3 Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，SAA3 Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

SAA3 Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。SAA3 Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，SAA3 Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，SAA3 Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

SAA3 Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA627Hu    人胱天蛋白酶9(CASP9)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Caspase 9 (CASP9)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB340Hu    人肌動(dòng)蛋白β(ACTβ)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Actin Beta (ACTb)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB343Hu    人Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Bcl2 Associated X Protein (Bax)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB347Hu    人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(ADCYAP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 1, Pituitary (ADCYAP1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB348Hu    人腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Adenylate Cyclase 1, Brain (ADCY1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB350Hu    人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Adipose Differentiation Related Protein (ADRP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA323Hu    人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1 (HNRPA2B1)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB028Hu    人抗白蛋白抗體(AAA)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Anti-Albumin Antibody (AAA)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA344Hu    人回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal (FABP6)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA430Hu    人沉默調(diào)節(jié)蛋白2(SIRT2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Sirtuin 2 (SIRT2)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA909Hu    人銅藍(lán)蛋白(CP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for HZruloplasmin (CP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA896Hu    人半*蛋白酶抑制劑3(CST3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Cystatin 3 (CST3)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA899Hu    人骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Osteopontin (OPN)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA893Hu    人Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type III Collagen (CTXIII)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA892Hu    人β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Beta-Crosslaps (bCTx)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA589Hu    人血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA382Hu    人蛋白激酶Bγ(PKBγ)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Protein Kinase B Gamma (PKBg)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA383Hu    人磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide (PIK3C2a)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA831Hu    人*/抗*復(fù)合體(TAT)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA832Hu    人纖溶酶/抗纖溶酶復(fù)合體(PAP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Plasmin/Antiplasmin Complex (PAP)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA833Hu    人血管性血友病因子(vWF)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF)    檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml