ELSIA操作步驟復雜，影響反應(yīng)因素較多，RPA-70 Elisa kit特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，RPA-70 Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

RPA-70 Elisa kit技術(shù)操作要點：

1. 標本的采取和保存。
2. 試劑的準備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。RPA-70 Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，RPA-70 Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，RPA-70 Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

RPA-70 Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA235Hu    人補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA239Hu    人α-黑色素細胞刺激素(αMSH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA243Hu    人對氧磷酶1(PON1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA283Hu    人甘膽酸(CG)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cholyglycine (CG)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA284Hu    人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)檢測試劑盒    ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA293Hu    人*脫氫酶(GDH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glutamate Dehydrogenase 1 (GDH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA294Ge    人*(GSH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glutathione (GSH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA295Hu    人*過氧化酶1(GPX1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA296Hu    人乳過氧化物酶(LPO)檢測試劑盒    ELISA Kit for Lactoperoxidase (LPO)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA297Hu    人核糖核酸酶A(RNASE1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Ribonuclease A (RNASE1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA305Hu    人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)檢測試劑盒    ELISA Kit for Thyroxine Binding Globulin (TBG)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA689Hu    人降鈣素原(PCT)檢測試劑盒    ELISA Kit for Procalcitonin (PCT)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA311Hu    人抗脫氧核糖核酸酶B(Anti-DNaseB)檢測試劑盒    ELISA Kit for Anti-Deoxyribonuclease B Antibody (Anti-DNaseB)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA313Hu    人抗神經(jīng)元核抗體1型(ANNA1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Anti-Neuronal Nuclear Antibody 1 (ANNA1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA316Hu    人X-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)檢測試劑盒    ELISA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA431Hu    人顆粒酶M(GZMM)檢測試劑盒    ELISA Kit for Granzyme M (GZMM)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA436Hu    人血小板衍生生長因子AB(PDGFAB)檢測試劑盒    ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor AB (PDGFAB)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA476Hu    人半*蛋白酶抑制劑A(CSTA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cystatin A (CSTA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB442Hu    人胸腺因子(TF)檢測試劑盒    ELISA Kit for Thymic Factor (TF)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB443Hu    人胎盤蛋白13(PP13)檢測試劑盒    ELISA Kit for PlaHZntal Protein 13 (PP13)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA930Hu    人細胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)檢測試劑盒    ELISA Kit for ExtraHZllular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml