ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，RLR Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，RLR Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

RLR Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。RLR Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，RLR Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，RLR Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

RLR Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA710Hu    人*原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA718Hu    人β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βAHZ1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bAHZ1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA230Hu    人*蛋白酶1(PRSS1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Protease, Serine 1 (PRSS1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA936Hu    人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA713Hu    人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(HZBPβ)檢測試劑盒    ELISA Kit for CCAAT/EnhanHZr Binding Protein Beta (HZBPb)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA750Hu    人補(bǔ)體受體2(CR2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Complement ReHZptor 2 (CR2)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA939Hu    人突觸核蛋白γ(γSYN)檢測試劑盒    ELISA Kit for Synuclein Gamma (SNCg)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA937Hu    人腎足蛋白(NPHN)檢測試劑盒    ELISA Kit for Nephrin (NPHN)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA938Hu    人足突蛋白(PDCN)檢測試劑盒    ELISA Kit for Podocin (PDCN)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA222Hu    人干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒    ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA768Hu    人足盂蛋白(PCX)檢測試劑盒    ELISA Kit for Podocalyxin (PCX)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA732Hu    人前列腺抑制肽(PIP)檢測試劑盒    ELISA Kit for Prostatic Inhibin Peptide (PIP)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA711Hu    人肝素酶(HPA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Heparanase (HPA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA022Hu    人血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)檢測試劑盒    ELISA Kit for Protein C ReHZptor, Endothelial (PROCR)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA734Hu    人蛋白C(PROC)檢測試劑盒    ELISA Kit for Protein C (PROC)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA735Hu    人*豐富蛋白(GRP)檢測試劑盒    ELISA Kit for Gla Rich Protein (GRP)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA736Hu    人蛋白Z(PROZ)檢測試劑盒    ELISA Kit for Protein Z (PROZ)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA738Hu    人激活蛋白C(APC)檢測試劑盒    ELISA Kit for Activated Protein C (APC)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA740Hu    人前列腺素I合酶(PTGIS)檢測試劑盒    ELISA Kit for Prostaglandin I Synthase (PTGIS)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB501Hu    人10kDa熱休克蛋白1(HSP10)檢測試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock 10kDa Protein 1 (HSP10)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB503Hu    人肌營養(yǎng)不良蛋白(DMD)檢測試劑盒    ELISA Kit for Dystrophin (DMD)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA979Hu    人親環(huán)素A(CYPA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cyclophilin A (CYPA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml