ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PT-Ab Elisa kit特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PT-Ab Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

PT-Ab Elisa kit技術(shù)操作要點：

1. 標本的采取和保存。
2. 試劑的準備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。PT-Ab Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PT-Ab Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PT-Ab Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PT-Ab Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyD856Hu    人氨基乙二酸轉(zhuǎn)氨酶(AADAT)檢測試劑盒    ELISA Kit for Aminoadipate Aminotransferase (AADAT)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH265Hu    人RalA結(jié)合蛋白1(RALBP1)檢測試劑盒    ELISA Kit for RalA Binding Protein 1 (RALBP1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA298Hu    人神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyK202Hu    人解整合素金屬蛋白酶28(ADAM28)檢測試劑盒    ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 28 (ADAM28)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ322Hu    人半*蛋白酶抑制劑B(CSTB)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cystatin B (CSTB)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC950Hu    人素受體1(CNR1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cannabinoid ReHZptor 1, Brain (CNR1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB448Hu    人信號素7A(SEMA7A)檢測試劑盒    ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF388Hu    人肌肽酶1(CNDP1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE594Hu    人泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)檢測試劑盒    ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2C)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC068Hu    人VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒    ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF303Hu    人細胞因子受體樣因子1(CRLF1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cytokine ReHZptor Like Factor 1 (CRLF1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC110Hu    人生長分化因子5(GDF5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF322Hu    人羧肽酶E(CPE)檢測試劑盒    ELISA Kit for Carboxypeptidase E (CPE)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE765Hu    人白介素23受體(IL23R)檢測試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 23 ReHZptor (IL23R)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA777Hu    人T-細胞可誘導(dǎo)共刺激分子(ICOS)檢測試劑盒    ELISA Kit for Inducible T-HZll Co Stimulator (ICOS)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC842Hu    人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 5 (SFRP5)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD021Hu    人重肽鐵蛋白(FTH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC684Hu    人2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)檢測試劑盒    ELISA Kit for 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 1 (OAS1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC805Hu    人腫廇蛋白P63(TP63)檢測試劑盒    ELISA Kit for Tumor Protein P63 (TP63)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG435Hu    人橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Desmocollin 1 (DSC1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC387Hu    人夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)檢測試劑盒    ELISA Kit for Charcot Leyden Crystal Protein (CLC)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE135Hu    人防御素α3(DEFα3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Defensin Alpha 3, Neutrophil Specific (DEFa3)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml